GDF-8 (Miostatină)

📦 Fiecare comandă este acoperită de politica noastră de Politica noastră de Reexpediere Garantată — dacă coletul dumneavoastră nu sosește în 20 de zile lucrătoare, îl relivrăm.

Ce este GDF-8 (Mioestatina)?

GDF-8 (Factorul de Creștere/Diferențiere 8), cunoscut în mod obișnuit sub numele de miostatină, este un membru al superfamiliei factorului de creștere transformator beta (TGF-β) și principalul regulator fiziologic negativ al masei musculare scheletice. A fost caracterizat pentru prima dată de McPherron, Lawler și Lee (Nature 1997) ca o proteină secretată a cărei perturbare țintită la șoareci a produs animale cu o masă musculară scheletică de două până la trei ori mai mare decât controalele de tip sălbatic. Același gen a fost rapid identificat drept cauza fenotipului “dublu-muscular” la bovinele Belgian Blue și Piedmontese, fenotipul Bully Whippet la câinii de cursă, și un caz documentat de hipermuscularitate infantilă izbitoare la om (Schuelke et al., NEJM 2004) — toate având mutații de pierdere de funcție în MSTN.

Mioestatina matură este generată prin procesare post-traducțională a unei preproproteine de 375 de aminoacizi: peptidele de semnal sunt eliminate în timpul secreției, apoi pro-domeniul (~243 aa) este clivat de proteaze furin, eliberând mioestatina matură C-terminală de 109 aminoacizi. Forma activă este un homodimer format din două lanțuri monomerice mature legate covalent printr-o punte disulfură intermoleculară, cu o masă aparentă de aproximativ 25,8 kDa pe SDS-PAGE nereducător. Proteina adoptă structura canonică TGF-β cu nod cisteinic și se leagă de receptorul activin tip IIB (ActRIIB) cu afinitate ridicată pentru a iniția semnalizarea mediată de Smad. GDF-8 recombinat este furnizat sub formă de pulbere liofilizată de înaltă puritate pentru reconstituire cu apă bacteriostatică. Mioestatina este neaprobat de FDA, EMA, MHRA sau orice alt regulator major pentru utilizare terapeutică umană. GDF-8 de grad de cercetare vândut aici este furnizat destinat doar pentru cercetare de laborator și nu este destinat administrării umane sau veterinare.

Mecanism de acțiune — Semnalizarea ActRIIB și axa Smad2/Smad3

Ceea ce face GDF-8 distinct din punct de vedere mecanic în rândul ligandilor superfamiliei TGF-β este rolul său dominant ca frână tonică asupra creșterii musculare printr-o cascadă de semnalizare bine caracterizată în trei pași, documentată în cercetările publicate:

• Legarea receptorului ActRIIB și recrutarea receptorului de tip I — Homodimerul matur de miostatină se leagă de receptorul de activină de tip IIB (ActRIIB) de pe suprafața fibrelor musculare scheletice și a altor tipuri de celule. ActRIIB este o serină/treonină kinază constitutiv activă care, după legarea miostatinei, recrutează și trans-fosforilează receptorii de tip I ALK4 (ActRIB) și ALK5 (TβRI). Stoichiometria ligand-receptor este un heterotetramer 2:2:2 în complexul activ. Knockout-ul ActRIIB produce un fenotip similar cu knockout-ul miostatinei, confirmând identitatea receptorului.
• Fosforilarea Smad2/Smad3 și translocarea nucleară — Receptorii de tip I ALK4/ALK5 fosforilați fosforilează Smad-urile regulate de receptor — în mod specific Smad2 și Smad3 în calea miostatinei. Fosfo-Smad2/Smad3 formează un complex heteromer cu Smad4 (Smad comun) și se translochează în nucleu, unde se leagă de elementele de legare Smad în promotorii genelor țintă și recrutează cofactori transcripționali. Calea Smad este principalul rezultat de semnalizare pentru miostatină în mușchiul scheletic.
• Efecte transcripționale downstream — upregularea atrogin-1/MuRF1 și suprimarea sintezei proteice — Complexul nuclear Smad coordonează un program transcriptional care promovează atrofia musculară prin trei mecanisme convergente: inducția genelor atrogene cu rol de ubiquitin-ligază (atrogin-1/Fbxo32 și MuRF1/Trim63) pentru a accelera degradarea proteinelor; inhibarea sintezei proteice mediate de Akt/mTOR prin interacțiune cu axa IGF/insulină; și suprimația factorilor regulatori miogenici (MyoD, miogenină) pentru a încetini repararea dependentă de celulele satelit. Efectul net este reducerea acumulării de proteine musculare și, la doze mari sau expunere cronică, atrofie evidentă.

Important pentru designul cercetării, GDF-8 acționează ca inhibitor tonic în condiții fiziologice — masa musculară este reglată de echilibrul dintre tonul miostatinei (atrofic) și semnalizarea IGF/Akt/mTOR (anabolică). Acesta este motivul pentru care Follistatin 344 (un antagonist miostatină/activină) și GDF-8 recombinant (agonistul în sine) sunt ambele utilizate în cercetarea musculară — antagonistul elimină frâna, în timp ce ligandul recombinant este instrumentul experimental care cuantifică cât de puternică este frâna și validează activitatea antagonistului în teste de legare la receptor și pe celule reporter.

Aplicații de Cercetare Publicate

GDF-8 recombinant este utilizat în contexte de cercetare de laborator care investighează:

• Cercetarea atrofiei și risipirii musculare — teste de atrofie pe miotube in-vitro, preparate musculare ex-vivo, administrare in-vivo pentru inducerea de fenotipuri de atrofie reproducibile în studiul strategiilor de intervenție (McPherron et al., Nature 1997; Lee, Annu Rev Cell Dev Biol 2004)
• Validarea antagonistului de miostatină — teste de afinitate de legare, teste de potență pentru anticorpi neutralizanți, teste de ocupare a receptorilor pentru programe de descoperire de medicamente care vizează calea miostatinei; instrument de cercetare canonic pentru validarea follistatin 344, proteine de fuziune ActRIIB-Fc solubile și anticorpi anti-miostatină
• Cercetarea căii de semnalizare Smad2/Smad3 — cinetica fosforilării Smad, imagistică de translocare nucleară, teste reporter cu elemente de legare Smad, interacțiuni cu alți membri ai căii TGF-β
• Cercetarea transcripției genelor atrogene — analiza promoterului atrogin-1 (Fbxo32) și MuRF1 (Trim63), activitatea ubiquitin-proteazomului, interacțiuni cu axa autofagiei
• Modele de cahezie și sarcopenie — modele de cahezie la rozătoare cu tumori, sarcopenie la șoareci în vârstă, atrofie indusă de denervare — GDF-8 recombinant utilizat pentru amplificarea sau recapitularea fenotipului de risipire
• Cercetare cardiacă și a altor țesuturi — nivelurile de miostatină sunt mai scăzute în inimă, țesutul adipos și alte țesuturi; cercetările publicate investighează efectele GDF-8 în modele de hipertrofie cardiomiocitară și biologia țesutului adipos
• Cercetare comparativă a superfamiliei TGF-β — compararea cu GDF-11 (90% identitate de secvență în domeniul matur) și activina A (se leagă de același sistem de receptori); analiza mecanică a selectivității receptorilor
• Pereche inversă de farmacologie cu Follistatin 344 — coadministrarea cu Follistatin 344 ca element antagonist permite cuantificarea directă a stoichiometriei de legare miostatină/antagonist și salvarea atrofiei induse de GDF-8 în modelele de cercetare.

Pentru un context mai larg privind locul GDF-8 în peisajul anabolic/cercetărilor musculare, consultați Follistatin 344 ca antagonist canonic al miostatinei, IGF-1 LR3 pentru ramura anabolică opusă (agonism direct IGF-1R) și TB-500 pentru cercetarea sistemica a recuperării musculare și a țesuturilor. Parcurgeți întregul de peptide de cercetare pentru compuși înrudiți.

Concentrații și doze disponibile

MedsBase deține GDF-8 recombinat (Miostatină) în flacoane liofilizate de 1 mg. Flaconul este disponibil în pachete de 10 sau 20 de flacoane cu instrucțiuni complete de reconstituire:

GDF-8 este o proteină recombinată homodimerică de ~25,8 kDa furnizată la o puritate ≥95% HPLC. Formatul de flacon de 1 mg acoperă gama tipică de doze de cercetare: concentrațiile de lucru nanomolare pentru teste de legare in vitro și teste pe celule reporter consumă fracțiuni mici dintr-un flacon; administrarea in vivo în modelele de rozătoare utilizează doze de micrograme pe injecție care consumă mai mult din flacon pe protocol.

Cum se compară — GDF-8 (Miozatină) vs Follistatin 344

GDF-8 recombinant și Follistatin 344 formează o pereche farmacologică inversă: GDF-8 este ligandul, iar Follistatin 344 este proteina de legare cu afinitate ridicată care îl sequestrează. Acestea sunt utilizate în mod obișnuit împreună în cercetare, deoarece funcția antagonistului poate fi cuantificată doar în raport cu ligandul. Relația este similară cu alte perechi inverse binecunoscute în farmacologie (de ex., agonist + antagonist al aceluiași receptor), dar la nivelul ligand-proteina de legare, nu la nivelul receptorului.

Pentru proiectarea cercetărilor musculare, perechea este utilizată împreună în trei moduri principale: (1) măsurarea afinității de legare (rezonanță plasmonică de suprafață, ELISA, calorimetrie izotermică de titrare) a interacțiunii folistatină-miostatină; (2) teste celulare de atrofie/salvare în care GDF-8 induce atrofia miotuburilor și coadministrarea de folistatină este testată pentru salvare; și (3) validare in vivo în care GDF-8 amplifică un fenotip de depleție pe care coadministrarea de folistatină îl atenuează. Cele două proteine sunt complementare din punct de vedere mecanic și rareori sunt studiate izolat.

Depozitare și reconstituire

Înainte de reconstituire: păstrați flacoanele liofilizate la frigider la 2–8 °C în ambalajul original pentru stocul de lucru pe termen scurt. Pentru stocarea pe termen lung a flacoanelor nedeschise, congelați la −20 °C. GDF-8 liofilizat este stabil la refrigerare până la 12 luni și la −20 °C până la 24 de luni — puțin mai scurt decât peptidele sintetice mici, deoarece dimerul recombinant mai mare, legat prin disulfură, este mai susceptibil la pliere incorectă și agregare în timp. Evitați ciclurile de îngheț-dezgheț pe pulberea liofilizată.

Procedura de reconstituire: injectați apă bacteriostatică pe peretele lateral al flaconului (nu direct pe tortul liofilizat). Pentru un flacon de 1 mg, 1,0 mL de apă bacteriostatică oferă o concentrație de lucru de 1 mg/mL. Agitați ușor — nu primește, Agitați — și așteptați 5–10 minute pentru dizolvare completă. Proteinele recombinante se dizolvă mai lent decât peptidele mici; agitația viguroasă poate perturba legăturile disulfurice intermoleculare și poate degrada activitatea. O soluție reconstituită corect ar trebui să fie clară și incoloră, fără particule vizibile. Pentru diluții de lucru sub 100 mcg/mL, adăugarea de proteină purtătoare (BSA la o concentrație finală de 0,1%) minimizează pierderile prin adsorbție pe suprafețele de plastic și sticlă.

După reconstituire: Depozitați la frigider la 2–8 °C și utilizați în termen de 30 de zile pentru stabilitate optimă. Nu înghețați soluția reconstituită — proteinele dimerice recombinante sunt deosebit de sensibile la denaturarea prin cicluri de înghețare-dezghețare, ceea ce duce la agregare și pierdere a activității de legare a receptorilor. Eliminați orice flacon care prezintă tulbureală, precipitat sau decolorare. Pentru testele de afinitate de legare care necesită calibrare precisă a răspunsului la doză, utilizați soluția proaspăt reconstituită în termen de 7 zile pentru cele mai reproductibile rezultate.

Întrebări frecvente

Pentru ce este utilizat GDF-8 (Miostatina) în cercetare?

GDF-8 recombinat este utilizat în cercetarea de laborator ca agonist canonic al căii miostatinei — este instrumentul experimental pentru inducerea fenotipurilor reproducibile de atrofie musculară, caracterizarea semnalizării Smad2/Smad3, validarea antagoniștilor miostatinei (inclusiv Follistatin 344 și proteinele de fuziune ActRIIB-Fc) și cuantificarea stoechiometriei de legare în testele farmacologice. Nu este utilizat pentru a “îmbunătăți” ceva în modelele de cercetare — este regulatorul negativ pe care cercetătorii doresc să îl înțeleagă și, în final, să îl inhibe. GDF-8 de grad de cercetare vândut aici este primește, aprobat de FDA și este furnizat strict pentru utilizare în cercetarea de laborator.

Cum diferă GDF-8 de Follistatina 344?

Cele două formează o pereche de farmacologie inversă. GDF-8 este ligandul activ al miostatinei — frâna de creștere musculară care induce atrofia prin semnalizarea Smad2/Smad3. Follistatina 344 este o proteină de legare cu afinitate ridicată care sequestrează GDF-8 și activina, îndepărtându-le de disponibilitatea receptorilor. În modelele de cercetare, GDF-8 induce sau amplifică fenotipul de atrofie, iar follistatina 344 îl salvează. Cele două sunt adesea utilizate împreună în testele de afinitate de legare, testele de salvare pe celule și studii de validare in vivo ale antagoniștilor căii miostatinei.

Cum diferă GDF-8 de GDF-11?

GDF-8 (miostatina) și GDF-11 au aproximativ 90% identitate de aminoacizi în domeniul matur și se leagă de același receptor ActRIIB cu afinitate comparabilă. Rolurile funcționale sunt parțial suprapuse, dar distincte în distribuția tisulară: GDF-8 este exprimat predominant în mușchiul scheletic și este regulatorul dominant al masei musculare; GDF-11 este exprimat mai larg și este studiat în contexte cardiace, neuronale și hematopoietice. Similitudinea de secvență face ca dezvoltarea de antagoniști selectivi să fie o prioritate în cercetarea actuală.

Care este doza tipică de GDF-8 în cercetare?

Protocoalele preclinice publicate utilizează de obicei concentrații de lucru de 10–100 ng/mL pentru experimente de cultură celulară in vitro (teste de atrofie a miotuburilor, teste pe celule reporter, studii de legare) și 0,1–10 mcg pe administrare pentru protocoale de inducere a atrofiei la rozătoare in vivo. Un flacon de 1 mg reconstituit cu 1,0 mL apă bacteriostatică oferă 1 mg/mL — diluția în PBS sau mediu de cultură oferă soluții de lucru nanomolare pentru utilizare in vitro.

Este GDF-8 aprobat de FDA?

Nu. GDF-8 / miostatina nu este aprobată de FDA, EMA, MHRA sau de orice alt regulator major pentru utilizare terapeutică umană. Cercetarea căii miostatinei a produs antagoniști în stadii clinice (anticorpi anti-miostatină, ActRIIB-Fc solubil, terapie genică cu follistatină), dintre care unii au ajuns în fazele finale de teste pentru distrofie musculară și sarcopenie, dar GDF-8 recombinat în sine nu este un terapeutic. Tot GDF-8 vândut de furnizori pentru uz exclusiv în cercetare este destinat investigațiilor de laborator și nu trebuie administrat oamenilor.

Cum trebuie depozitat GDF-8?

Flacoane liofilizate: la frigider la 2–8 °C pentru stoc de lucru pe termen scurt, sau la −20 °C pentru depozitare pe termen lung a flacoanelor nedeschise. Soluție reconstituită: la frigider la 2–8 °C, utilizați în termen de 30 de zile pentru protocoale generale sau în termen de 7 zile pentru testele de afinitate de legare care necesită calibrare precisă. Nu înghețați soluția reconstituită — proteinele dimerice recombinante sunt deosebit de sensibile la denaturarea prin cicluri de înghețare-dezghețare. Protejați de lumina directă în permanență. Se recomandă utilizarea de proteină purtătoare (BSA la 0,1%) pentru diluții de lucru sub 100 mcg/mL.

Cum reconstitui GDF-8?

Urmați procedura de reconstituire menționată mai sus. Adăugați apă bacteriostatică pe peretele lateral al flaconului (nu direct pe tortul liofilizat), amestecați ușor și lăsați 5–10 minute pentru dizolvare completă. Nu primește, agitați flaconul — agitarea viguroasă poate perturba legătura disulfură intermoleculară și poate degrada activitatea. O soluție reconstituită corect este limpede și incoloră, fără particule vizibile. Pentru un flacon de 1 mg + 1,0 mL diluent, concentrația de lucru este de 1 mg/mL.

De ce specificația de puritate este de 95% și nu de 99%?

Proteinele recombinante precum GDF-8 nu pot atinge standardul de puritate ≥99% prin HPLC, tipic pentru peptidele sintetice mici, din cauza heterogenității inerente a oricărui sistem de expresie recombinantă — intermediari de pliere diferiți și forme de disulfură-izomer apar ca vârfuri înrudite pe HPLC care nu sunt impurități, ci izoforme ale proteinei țintă. O puritate ≥95% prin HPLC este specificația standard de calitate cercetător pentru GDF-8 și proteine dimerice recombinante similare legate prin disulfură. SDS-PAGE arată de obicei banda așteptată de ~25,8 kDa în condiții nereducătoare și monomerul de ~12,9 kDa în condiții reducătoare.

Ce doze stochează MedsBase?

MedsBase comercializează GDF-8 recombinat (Miostatină) în flacoane liofilizate de 1 mg. Flaconul este disponibil în pachete de 10 sau 20 de flacoane. Toate flacoanele sunt furnizate cu o puritate ≥95% prin HPLC, cu certificat de analiză disponibil la cerere.

Pot fi asociate GDF-8 și Follistatin 344 în cercetare?

Da — acesta este cazul de utilizare canonic. Cele două sunt asociate în mod obișnuit în trei moduri principale: (1) măsurarea afinității de legare prin SPR, ELISA sau ITC a interacțiunii follistatină-miostatină; (2) teste de atrofie/salvare pe celule în care GDF-8 induce atrofia miotubelor și co-tratamentul cu follistatină salvează; și (3) studii in-vivo în care GDF-8 amplifică un fenotip de depleție pe care co-administrarea de follistatină îl atenuează. Asocierea inversă farmacologică este fundamentală în proiectarea cercetării pe axa miostatinei.

Cauzează GDF-8 efecte secundare în cercetare?

Principalul efect țintă al GDF-8 recombinat în modelele de cercetare este atrofia musculară — aceasta este acțiunea farmacologică intenționată, nu un efect secundar. Descoperirile off-target includ efecte modeste asupra țesuturilor cardiace și adipose, în concordanță cu expresia mai scăzută a ActRIIB în acele compartimente. La doze foarte mari, pot fi observate efecte mai largi legate de superfamilia TGF-β asupra fibrozei și inflamației, atribuite interacțiunii receptorilor cu căile activinei și GDF-11.

Care este timpul de înjumătățire al GDF-8?

În cercetările preclinice, GDF-8 matur recombinant are un timp de înjumătățire plasmatic de aproximativ 2–4 ore după administrare intravenoasă. Endogen, miostatina matură circulă legată de propriul pro-domeniu (complex latent) și de follistatin/alte proteine de legătură, ceea ce prelungește dramatic timpul de înjumătățire efectiv în țesut. Pentru protocoalele de cercetare, dimerul activ recombinant este administrat fără pro-domeniu pentru a furniza miostatină “liberă” receptorului ActRIIB.

De ce a fost descoperit inițial GDF-8?

GDF-8 a fost identificat de McPherron, Lawler și Lee la Johns Hopkins (Nature 1997) folosind o strategie de screening prin PCR degenerată concepută pentru a găsi noi membri ai superfamiliei TGF-β. Disruptia țintită la șoareci a produs animale cu o masă musculară scheletică de două până la trei ori mai mare decât controalele de tip sălbatic — un fenotip izbitor care a stabilit imediat miostatina ca regulatorul fiziologic negativ dominant al creșterii musculare. Legătura cu fenotipurile naturale de “dublu-musculatură” la bovinele Belgian Blue și câinii Whippet a fost stabilită în câteva luni, iar un caz de mutație MSTN umană a fost publicat în NEJM în 2004.

Cât timp durează ca GDF-8 să manifeste efecte în cercetarea preclinică?

Efectele in-vitro asupra fosforilării Smad2/Smad3 sunt detectabile în câteva minute după expunerea celulelor. Atrofia miotuburilor în testele pe celule este măsurabilă în 24–72 de ore. Fenotipurile de atrofie in-vivo în modelele de rozătoare se dezvoltă în 1–4 săptămâni de administrare regulată, cu cinetica dependentă de doză, rută și masa musculară de bază a organismului model.

Pot comanda GDF-8 pentru transport internațional?

Da. MedsBase expediază GDF-8 în întreaga lume prin rețeaua noastră dedicată de transport de peptide. Comenzile care conțin doar peptide se califică pentru serviciul nostru separat de transport de peptide. Toate comenzile sunt expediate în ambalaje cu control al temperaturii cu urmărire completă și sunt acoperite de Politica noastră de Reexpediere Garantată.

Alte peptide pentru cercetarea anabolică, musculară și a axei de creștere

• Follistatin 344 — Proteină de legare antagonistă a miostatinei/activinei — perechea de farmacologie inversă față de GDF-8
• IGF-1 LR3 — Analog recombinant IGF-1 cu arginină lungă — stimul anabolic pe cale opusă prin IGF-1R
• TB-500 (Thymosin Beta-4) — Fragment de vindecare sistemică — cercetarea recuperării musculare și cardiace
• CJC-1295 cu DAC — Analog GHRH cu acțiune prelungită — cercetarea axei hormonului de creștere
• Sermorelin — Analog GHRH(1-29) cu acțiune mai scurtă — cercetarea pulsului natural de GH

Lectură suplimentară

Mai multe opțiuni în Peptide

Clasificate în funcție de volumul recent de comenzi MedsBase — ce aleg alți clienți în această categorie.

BPC-157

US$115.00 – US$705.00Interval de preț: US$115.00 până la US$705.00

Retatrutidă

US$310.00 – US$6,515.00Interval de preț: US$310.00 până la US$6,515.00

Apă BAC (Apă bacteriostatică)

US$50.00 – US$150.00Interval de preț: US$50.00 până la US$150.00

NAD⁺

US$210.00 – US$1,975.00Interval de preț: US$210.00 până la US$1,975.00