LL-37 (Кателицидинов антимикробен пептид)

📦 Всяка поръчка е покрита от нашата Политика за повторна изпратка — ако вашата пратка не пристигне в рамките на 20 работни дни, ние я изпращаме отново.

Какво е LL-37?

LL-37 е активният C-краен 37-аминокиселинен пептид, освободен чрез протеолитично разцепване на човешкия кателицидин антимикробен пептид hCAP-18 — единственият продукт на кателицидинния ген при хората, кодиран от CAMP гена в хромозома 3. Пептидът получава името си от първите си два остатъка (Leu-Leu) и дължината си (37 остатъка). Той принадлежи към семейството кателицидини на пептиди за защита на вродения имунитет, срещани при повечето гръбначни, и представлява централната ефекторна молекула в човешката кателицидинна част на вродения имунитет, заедно с семейството дефензини.

Неактивната hCAP-18 проформа се произвежда в неутрофилни гранули, в епителни повърхности (кератиноцити на кожата, респираторен и чревен епител), и в по-малки количества от макрофаги, NK клетки, мастни клетки, B-клетки и γδ T-клетки. Активирането става чрез разцепване от протеиназа-3 (в неутрофили) или от каликреин-5/каликреин-7 (в кожата), освобождавайки биоактивния 37-мер, който приема силно амфипатична α-спирална конформация в мембрано-подобни среди. Пептидът носи +6 нетен положителен заряд при неутрално pH, с катионни лизинови и аргининови остатъци, концентрирани на едната страна на спиралата, и хидрофобни леуцинови, фенилаланинови, изолеуцинови и валинови остатъци на противоположната страна — каноничната “амфипатична α-спирална” архитектура, която позволява селективно взаимодействие с отрицателно заредени микробни мембрани.

LL-37 комбинира две различни модалности за защита на домакина в един пептид. Неговата директна антимикробна активност обхваща Грамположителни бактерии (включително метицилин-резистентни S. aureus, MRSA), Грамотрицателни бактерии (включително E. coli, K. pneumoniae, P. aeruginosa), обвити вируси (HSV-1, инфлуенца, RSV), гъбички (Candida), и микробни биофилми. Неговата имуномодулаторна активност включва свързване и неутрализиране на бактериален липополизахарид (LPS) и липотейхоева киселина, хемотаксис на неутрофили / моноцити / Т-клетки / мастни клетки чрез рецептор за формил пептиди подобен на-1 (FPRL1/FPR2), модулация на TLR сигнализацията, потискане на LPS-индуцирани цитокинови бури, индуциране на ангиогенеза чрез FPRL1 сигнализация на ендотелните клетки и стимулиране на миграцията на кератиноцити при заздравяване на рани. Дисрегулацията на LL-37 е замесена в патогенезата на псориаза (където излишъкът от LL-37 се свързва с собствена ДНК, за да активира плазмоцитоидни дендритни клетки), атеросклероза и определени видове рак. LL-37 е неодобрен от FDA, EMA, MHRA или друг основен регулаторен орган за терапевтична употреба при хора. Изследователският LL-37, който се предлага тук, се доставя само за лабораторни изследвания и не е предназначен за човешка или ветеринарна употреба.

Механизъм на действие — Разрушаване на мембраната + Имуномодулация

LL-37 действа чрез три основни механизма, документирани в публикувани изследвания:

• Селективно разрушаване на микробната мембрана чрез вмъкване на амфипатична α-спирала — В обемен воден разтвор LL-37 е предимно неструктуриран, но при контакт с отрицателно заредена микробна мембрана (богата на фосфатидилглицерол, кардиолипин, липотейхоева киселина или LPS) бързо се сгъва в амфипатична α-спирала. Катионната страна взаимодейства с анионната повърхност на мембраната; хидрофобната страна се вмъква в липидния бислой. При прагови съотношения пептид-липид това води до образуване на тороидални пори или “килимовидно” разпадане на мембраната, деполяризиране на микробната клетка и нарушаване на жизненоважните трансмембранни градиенти. Мембраните на бозайническите клетки са защитени от своя звитерионен външен слой (фосфатидилхолин, сфингомиелин) и наличието на холестерол — осигурявайки степен на микробна селективност, която отличава AMP от широко цитотоксични детергенти.
• Неутрализиране на LPS и модулация на TLR4 пътя — LL-37 се свързва директно с бактериалния липополизахарид (LPS) с висока афинитет, изолирайки го от рецепторния комплекс TLR4 / MD-2 / CD14. Това блокира LPS-задвижваната активация на NF-κB, намалява освобождаването на TNF-α / IL-6 / IL-1β и защитава тъканта на домакина от сепсисоподобни цитокинови бури при тежки грам-отрицателни инфекции. Същото свойство прави LL-37 изследователски инструмент за разглобяване на LPS-задвижваната сигнализация.
• Имуномодулация чрез FPRL1 (рецептор за формил пептиди тип 1) и надолу по сигналния път — LL-37 действа като хемоатрактант за неутрофили, моноцити и Т-клетки чрез свързване с FPRL1 (FPR2), G-протеин-свързан рецептор, изразен широко върху ефекторни клетки на вродения имунитет. Същият рецептор върху ендотелните клетки опосредства проангиогенния ефект на LL-37 — стимулирайки пролиферация, миграция и образуване на тръбички от ендотелни клетки. Миграцията на кератиноцити по време на реепителизация на рани също зависи от FPRL1. Пептидът освен това взаимодейства с пуринергичните P2X7 рецептори на макрофаги, допринасяйки за модулация на инфламасомата.

Отличителна характеристика на биологията на LL-37 е “меч срещу щит” баланс: при ниски концентрации пептидът предимно има имуномодулаторен и тъканно-защитен ефект, докато при високи локални концентрации доминира пряката мембранно-деструктивна активност. Това функционално превключване в зависимост от концентрацията е една от причините LL-37 да представлява терапевтичен интерес както в антимикробните, така и в рано-заздравяващите изследвания, както и защото детайлната характеристика на доза-отговор е критична във всеки in-vitro или in-vivo протокол.

Публикувани изследователски приложения

LL-37 се използва в лабораторни изследователски контексти, които изследват:

• Изследвания на антимикробна резистентност — панели за минимална инхибиторна концентрация (MIC) с широк спектър срещу MRSA, ESBL-продуциращи Enterobacteriaceae, карбапенем-резистентни щамове и биофилм-асоциирани патогени; бенчмаркинг на разработката на антимикробни пептиди (AMP)
• Изследвания на биофилми — тестове за предотвратяване на биофилми, тестове за разрушаване на установени биофилми срещу P. aeruginosa, S. aureus, и K. pneumoniae — важни в контекста на изследвания на муковисцидоза и хронични рани
• Изследвания на LPS / сепсис — тестове за неутрализиране на LPS, изследване на TLR4 сигнализиране, модели на цитокинов буря при септичен шок
• Изследвания на заздравяване на рани и кожа — тестове за миграция на кератиноцити, модели на дермални фибробласти и ендотелно затваряне на рани; един от основните изследователски пептиди в изследванията на заздравяване на кожни рани
• Изследване на патогенезата на псориазаза — LL-37 / собствена ДНК / анализ на плазмоцитоидни дендритни клетки (LL-37 е свръхекспресиран в псориатичната кожа и образува комплекси със собствена ДНК, които нарушават толерантността чрез TLR9 в pDC)
• Изследване на атеросклерозата — LL-37 в макрофагите на плаката, взаимодействие с окислен LDL, модели на съдово възпаление
• Онкологични изследвания — парадоксални про- и антитуморни ефекти в зависимост от вида на тумора (LL-37 има про-пролиферативен ефект при някои видове рак чрез FPRL1, антитуморен ефект при други чрез директно нарушаване на мембраната на туморните клетки)
• Механистични изследвания на вродения имунитет — сигнализиране чрез FPRL1, модулация на P2X7, биология на неутрофилните екстрацелуларни мрежи (NET), индукция на CAMP чрез витамин D

За по-широк контекст на изследванията върху вродения имунитет и пептидите за защита на гостоприемника, вижте KPV (противовъзпалителен трипептид, получен от α-MSH), BPC-157 (пентадекапептид за репарация на тъкани с множество пътеки), и TB-500 (фрагмент от Тимозин Бета-4, широка репарация на тъкани). Разгледайте пълния каталог с изследователски пептиди за свързани съединения.

Налични дози и концентрации

MedsBase предлага LL-37 в лиофилизирани флакони от 5 mg. Налични в опаковки от 10 или 20 флакона с пълни указания за реконституиране:

LL-37 се доставя като немодифицирана линейна 37-мерна свободна киселинна форма (без ацилиране, без PEG-лиране, без дисулфиден мост). Пептидът е чувствителен към адсорбция върху пластмаса — изследователите трябва да използват тръби с ниско свързване за съхранение на запаси и разреждане. Работните концентрации в публикуваните тестове варират от ~0,5 µg/mL в тестове за хемотаксис до ~50 µg/mL в тестове за пряко антимикробно действие.

Как се сравняват — LL-37 срещу KPV

LL-37 и KPV и двете се използват в изследвания на вродения имунитет, но действат на напълно различни нива и се насочват към различни механизми. LL-37 е пълен 37-аминокиселинен пептид за защита на организма, който комбинира пряко антимикробно разрушаване на мембраните с имуномодулация, опосредствана от FPRL1. KPV (Лизин-Пролин-Валин) е 3-аминокиселинен C-терминален фрагмент от α-меланоцит-стимулиращ хормон (α-MSH), който действа като фокусиран противовъзпалителен и умерен антимикробен пептид чрез модулация на меланокортиновия рецепторен път.

За изследвания, фокусирани върху широкоспектърна антимикробна активност, нарушаване на биофилмовите слоеве или механизми на мембранни пори, LL-37 е каноничният референтен пептид. За изследвания, фокусирани върху противовъзпалителна сигнализация по меланокортиновия път на клетъчно ниво, KPV е по-селективният инструмент. Вижте също BPC-157 за противовъзпалителни изследвания, фокусирани върху възстановяване на тъканите, и TB-500 за широко сравнение на възстановяването на тъканите.

Съхранение и реконституиране

Преди реконституиране: съхранявайте лиофилизирани флакони в хладилник при 2–8 °C в оригиналната опаковка за краткосрочно използване. За дългосрочно съхранение, замразявайте неотворените флакони при −20 °C. Лиофилизираният LL-37 е стабилен при хладилно съхранение до 24 месеца и при −20 °C до 36 месеца. Избягвайте цикли на замразяване и размразяване на лиофилизирания прах. Както всички катионни AMP, LL-37 е склонен към пластична адсорбция — дори и малки загуби в стандартни полипропиленови епруветки могат да объркат данните за доза-отговор. Използвайте епруветки с ниска адсорбция (силицирано стъкло, Protein LoBind или полипропилен, предварително покрит с говежди серумен албумин) за съхранение на запаси и серийни разреждания в буфери с ниско съдържание на протеини. .

Процедура за реконституиране: инжектирайте бактериостатична вода по стената на флакона (не директно върху лиофилизираната маса). За флакон от 5 mg, 1.0 mL бактериостатична вода дава работна концентрация от 5 mg/mL; 2.0 mL дава работен разтвор от 2.5 mg/mL. Разбъркайте леко — не разбърквайте агресивно, тъй като пененето задържа въздух и може да наруши сгъването на хеликса. Оставете праха да се разтвори напълно (обикновено 1–2 минути) преди да извлечете разтвора. За приложения, чувствителни към бактериостатични агенти (експерименти с клетъчни култури), реконституирайте в стерилна вода или 0.01% оцетна киселина. След реконституиране, съхранявайте флакона при 2–8 °C и използвайте в рамките на 14–28 дни. Защитавайте от светлина. Изхвърлете, ако се появи мътност, частици или промяна в цвета.

Често задавани въпроси

Дали LL-37 е същото като кателицидин?

LL-37 е активният C-терминален 37-аминокиселинен пептид, освободен от човешкия кателицидин (неактивната проформа hCAP-18, кодирана от гена CAMP). Кателицидин е името на семейството и се отнася до много видове гръбначни; LL-37 е специфичното име на активния човешки кателицидинов пептид. Други имена, които може да срещнете в литературата — CAP-18 и FALL-39 — се отнасят до същата молекула според различни исторически наименувания.

Как LL-37 се различава от дефензините?

LL-37 и дефензините (α- и β-дефензини) са двете основни семейства на антимикробните пептиди при бозайниците. Дефензините са по-малки, богати на цистеин и приемат β-листови структури, стабилизирани от 3 дисулфидни връзки. LL-37 е по-дълъг линеен катионен пептид, който приема амфипатична α-хеликсна структура в мембранни среди — без дисулфидни мостове. И двата класа имат широка антимикробна активност и имуномодулаторни роли, но действат чрез структурно различни механизми.

Каква е типичната ефективна концентрация на LL-37 в антимикробните тестове?

Публикуваните минимални инхибиторни концентрации (MIC) за LL-37 срещу чувствителни Gram-положителни и Gram-отрицателни патогени обикновено са в диапазона от 1 до 32 µg/mL в зависимост от щама, йонната сила на буфера и формата (биофилм или планктон). По-високи концентрации (50–100 µg/mL) обикновено се използват за изследвания на директно нарушаване на мембраните и тестове за елиминиране на биофилми. Имуномодулаторните измервания (хемотаксис, неутрализация на LPS, миграция на кератиноцити) обикновено използват много по-ниски концентрации (0.5–10 µg/mL). Определете диапазоните на дозите от рецензирана литература, подходяща за вашия конкретен протокол.

Защо пластичната адсорбция е важна за LL-37?

Катионните AMP като LL-37 могат значително да адсорбират към стандартни полипропиленови и полистиролови лабораторни съдове, особено в буфери с ниско съдържание на протеини. В литературата са документирани загуби от 30–80% при едно прехвърляне в епруветка за катионни пептиди при ниски концентрации. Това може да доведе до системно подценяване на активността, особено в серии от разреждания за определяне на MIC. Използвайте епруветки с ниска адсорбция, предварително покривайте епруветките с BSA или включвайте носител на протеин в буферите за разреждане, според изискванията на теста.

Как LL-37 различава микробните от бозайническите мембрани?

Селективността възниква от състава на мембраните. Микробните мембрани (особено външните мембрани на Gram-отрицателните и цитоплазматичните мембрани на Gram-положителните) са богати на отрицателно заредени липиди (фосфатидилглицерол, кардиолипин, LPS, липотейхоева киселина). Бозайническите цитоплазматични мембрани имат цвитерионен външен слой (фосфатидилхолин, сфингомиелин) и високо съдържание на холестерол, което стабилизира бислоя. Катионната страна на LL-37 предпочита да взаимодейства с отрицателно заредената микробна повърхност; стабилизираната с холестерол бозайническа мембрана е много по-малко податлива на вмъкване. Селективността зависи от концентрацията — при много високи локални концентрации LL-37 може да стане цитотоксичен и за бозайническите клетки.

Какво е моделът “меч срещу щит” за функцията на LL-37?

Моделът описва функционалното превключване на LL-37 в зависимост от концентрацията: при ниски концентрации (20 µg/mL) доминира пряката антимикробна активност, нарушаваща мембраните. Този двоен характер подчертава разнообразните роли на LL-37 в защитата на организма и е една от причините за необходимостта от внимателна характеристика на доза-отговор във всеки in-vitro или in-vivo изследователски контекст.

Каква е връзката между LL-37 и псориаза?

LL-37 е значително свръхекспресиран в псориатичните кожни лезии и силно се свързва със собствена ДНК и РНК, освободени от увредени кератиноцити. Тези LL-37 / собствени нуклеиновокиселинни комплекси активират плазмоцитоидните дендритни клетки чрез TLR9 (ДНК) и TLR7 (РНК), предизвиквайки IFN-α-богатото автоимуноподобно възпаление, характерно за псориазата. Насочването към LL-37 / pDC / TLR ос е активна област от изследванията в псориазата.

Защо някои изследвания върху рака са про-туморни, докато други са анти-туморни?

LL-37 има документирани контекстно-зависими ефекти върху рака. При някои видове тумори (яйчници, гърда, бели дробове, колоректални) повишената експресия на LL-37 корелира с по-лош прогноз — вероятно чрез FPRL1-опосредувани про-пролиферативни и про-ангиогенни сигнали. При други (стомашни, меланома в някои модели) LL-37 има директен мембранно-разрушаващ цитотоксичен ефект върху туморните клетки с по-слаба анти-туморна активност. Крайният ефект зависи от вида на тумора, локалната концентрация, експресията на FPRL1 и състава на туморния микрореди.

Още опции в Пептиди

Класирани според скорошния обем на поръчки в MedsBase — какво избират други клиенти в тази категория.

BPC-157

US$115.00 – US$705.00Zakres cen: US$115.00 do US$705.00

Retatrutide

US$310.00 – US$6,515.00Zakres cen: US$310.00 do US$6,515.00

BAC вода (Бактериостатична вода)

US$50.00 – US$150.00Zakres cen: US$50.00 do US$150.00

NAD⁺

US$210.00 – US$1,975.00Zakres cen: US$210.00 do US$1,975.00