AOD-9604 (Farmaco Anti-Obesità 9604 / Tyr-hGH 177-191)

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Cos'è AOD-9604?

AOD-9604 (“Anti-Obesity Drug 9604”; CAS 221231-10-3) è un peptide sintetico di 16 aminoacidi sviluppato da Metabolic Pharmaceuticals Ltd presso la Monash University a Melbourne, Australia, a partire dalla fine degli anni '90. È un analogo stabilizzato del frammento lipolitico C-terminale dell'ormone della crescita umano nativo (residui 177–191), al quale è stata aggiunta una tirosina N-terminale per rallentare la degradazione proteolitica amino-terminale. Sequenza Tyr-Leu-Arg-Ile-Val-Gln-Cys-Arg-Ser-Val-Glu-Gly-Ser-Cys-Gly-Phe (YLRIVQCRSVEGSCGF), con il ponte disolfuro intramolecolare Cys182–Cys189 del parentale hGH preservato come Cys7–Cys14 nella numerazione del frammento. Peso molecolare 1815.1 g/mol, formula empirica C₇₈H₁₂₃N₂₃O₂₃S₂.

La logica farmacologica dietro AOD-9604 è uno degli esempi più chiari di dissezione struttura-funzione nella ricerca sui peptidi dell'HGH. L'ormone della crescita umano a lunghezza intera (191 aminoacidi) ha almeno due distinte attività biologiche: effetti anabolici/promuoventi la crescita (mediati attraverso il recettore GH, segnalazione JAK2/STAT5 e produzione a valle di IGF-1) e effetti lipolitici/anti-lipogenici (mediati attraverso un meccanismo separato, non completamente caratterizzato, che non richiede l'interazione con il recettore GH). L'ipotesi del gruppo Monash era che l'attività lipolitica fosse codificata nella regione C-terminale della molecola — e che un peptide sintetico che comprende solo quella regione potesse mantenere l'attività di mobilizzazione dei grassi perdendo l'attività di coinvolgimento dell'asse della crescita. Questo si è dimostrato corretto nella ricerca pubblicata in vitro e su roditori: il frammento 176–191 mantiene l'attività lipolitica e anti-lipogenica in colture di adipociti e modelli murini DIO, ma non lega GHR, non attiva JAK2/STAT5 e non induce IGF-1.

AOD-9604 ha progredito attraverso numerosi studi clinici di Fase I e Fase II all'inizio-metà degli anni 2000, culminando in uno studio di Fase IIb sull'obesità di 28 settimane (~500 pazienti) completato nel 2007 da Metabolic Pharmaceuticals. Lo studio non ha raggiunto il suo endpoint primario di perdita di peso, e il programma di sviluppo farmacologico per l'obesità è stato interrotto. AOD-9604 è successivamente entrato nei mercati dei peptidi di ricerca e degli integratori non regolamentati, dove è rimasto uno dei peptidi più citati per la “perdita di grasso” nella letteratura non clinica. Il composto mantiene utilità nella ricerca come strumento farmacologico canonico per studiare la lipolisi disaccoppiata da GHR, la biologia del frammento C-terminale dell'hGH e la base struttura-funzione delle molteplici attività dell'HGH.

Una nota sulla nomenclatura: AOD-9604 e “Frammento HGH 176-191” sono spesso usati in modo intercambiabile nel mercato dei fornitori e dei peptidi di ricerca. In senso stretto, AOD-9604 (CAS 221231-10-3) è l'analogo sviluppato da Metabolic Pharmaceuticals con la stabilizzazione della tirosina N-terminale. “HGH Fragment 176-191” (CAS 66004-57-7 secondo alcune referenze) è il più vecchio frammento 177–191 dell'hGH non stabilizzato da cui è derivato AOD-9604. Entrambi condividono la stessa sequenza di aminoacidi YLRIVQCRSVEGSCGF in molte preparazioni dei fornitori — ma la designazione AOD-9604 identifica specificamente il composto di ricerca registrato da Metabolic Pharmaceuticals. I ricercatori dovrebbero consultare il COA per confermare a quale forma corrisponde un dato lotto del fornitore.

Meccanismo d'Azione — Lipolisi Disaccoppiata da GHR

Il meccanismo di AOD-9604 è tra i più discussi nella ricerca sui peptidi dell'HGH:

• Assenza di legame al recettore GH — La superficie di legame del GHR dell'hGH nativo è contenuta nella metà N-terminale della molecola (regione dei residui 1-120), assente nel frammento AOD-9604/176-191. Di conseguenza, l'AOD-9604 NON si lega al recettore dell'ormone della crescita (GHR), NON attiva la segnalazione JAK2/STAT5, NON induce la produzione epatica di IGF-1 e NON produce gli effetti promuoventi la crescita, stimolanti i condrociti o contro-regolatori dell'insulina della molecola HGH 191AA originaria. Questa è la proprietà negativa farmacologica distintiva e la base per l'utilità dell'AOD-9604 come strumento di ricerca che isola l'asse della lipolisi.
• segnalazione del recettore β3-adrenergico (ipotesi) — L'ipotesi meccanicistica principale per l'attività lipolitica dell'AOD-9604 è che interagisca con il recettore β3-adrenergico (ADRB3) sugli adipociti, direttamente come modulatore allosterico o tramite una via intermedia. Ricerche in vitro pubblicate hanno dimostrato che l'effetto lipolitico dell'AOD-9604 è attenuato dagli antagonisti β3-adrenergici, supportando l'ipotesi del β3-AR, sebbene il legame diretto AOD-9604/β3-AR non sia stato dimostrato in modo conclusivo nei saggi di legame con radioligando. Il meccanismo rimane incompletamente caratterizzato — un aspetto di cui i ricercatori dovrebbero essere consapevoli nell'interpretare i risultati pubblicati sull'AOD-9604.
• Attivazione dell'ormone-sensibile lipasi (HSL) — A valle dell'interazione con il recettore, è stato riportato che l'AOD-9604 attiva l'ormone-sensibile lipasi degli adipociti tramite fosforilazione mediata da PKA (la via canonica di attivazione della lipolisi), promuovendo l'idrolisi dei trigliceridi in glicerolo e acidi grassi liberi. L'aumento del rilascio di acidi grassi liberi in circolo è stato documentato in studi in vivo su roditori pubblicati dopo somministrazione di AOD-9604.
• Attività anti-lipogenica — Oltre a promuovere la lipolisi, è stato riportato che l'AOD-9604 sopprime la lipogenesi de novo negli adipociti coltivati — riducendo l'attività dell'acetil-CoA carbossilasi (ACC) e della sintasi degli acidi grassi (FAS) nei saggi di differenziazione 3T3-L1. Il profilo combinato di aumento della lipolisi/diminuzione della lipogenesi è la farmacologia canonica di “mobilizzazione dei grassi” che il programma originale Metabolic-Pharmaceuticals era progettato per attivare.
• Ricerca sulla cartilagine/osteoartrite (indicazione secondaria) — Dopo il fallimento del programma sull'obesità, l'AOD-9604 è stato riposizionato per la valutazione nella ricerca sull'osteoartrite, con l'ipotesi che gli effetti condroprotettivi dell'hGH originario possano essere parzialmente conservati nel frammento C-terminale. Ricerche in vitro e su piccoli animali pubblicate hanno riportato effetti protettivi sui condrociti, sebbene nessun ampio studio clinico su questa indicazione sia stato completato.
• Il problema dell'emivita di 4 minuti — L'emivita plasmatica dell'AOD-9604 è di circa 4 minuti, determinata dalla rapida troncatura proteolitica dell'ammino-terminale nonostante la stabilizzazione della Tyr N-terminale. Questo profilo farmacocinetico molto breve è una delle principali ipotesi per cui lo studio di fase IIb sull'obesità non ha raggiunto gli endpoint di perdita di peso — il frammento viene degradato prima che un'esposizione sufficiente al recettore possa accumularsi nel tessuto adiposo bersaglio con una somministrazione SC una volta al giorno. Nuovi peptidi di ricerca che mirano alla stessa biologia dell'asse lipolitico con emivite più lunghe (frammenti di hGH modificati con stabilizzazione PEG, proteine di fusione frammento-Fc) sono in fase di ricerca iniziale e non sono commercialmente disponibili.

La combinazione di disaccoppiamento meccanicisticamente pulito dal GHR e deludente emivita in vivo rende l'AOD-9604 uno strumento di ricerca utile con una storia farmacologica chiara ma una limitazione traslazionale documentata. La dose di ricerca pubblicata nei roditori è tipicamente 100-1.000 µg/kg/die SC, con l'estremità superiore di questo intervallo utilizzata per superare la breve emivita saturando la clearance. Nel lavoro di coltura cellulare, vengono utilizzate concentrazioni micromolari a causa della breve emivita biologica del frammento nel terreno di coltura.

Applicazioni della Ricerca Pubblicata

L'AOD-9604 è utilizzato in contesti di ricerca di laboratorio che studiano:

• Farmacologia della lipolisi disaccoppiata dal GHR — lo strumento di ricerca canonico per studiare l'attività lipolitica/anti-lipogenica del frammento C-terminale dell'hGH isolato dalla segnalazione dell'asse GH; composto di riferimento standard per qualsiasi nuova ricerca su frammenti di hGH con effetto “solo perdita di grasso”
• Ricerca struttura-funzione dell'HGH — L'AOD-9604 è uno degli esempi più puri di dissezione farmacologica struttura-funzione della molecola multiactivity HGH; utilizzato in ricerche pubblicate che mappano i residui del dominio lipolitico dell'HGH nativo
• Biologia degli adipociti e ricerca sulla lipolisi — induce lipolisi in preparazioni di adipociti 3T3-L1 coltivati e adipociti primari; utilizzato nella ricerca sulla regolazione della lipasi ormono-sensibile degli adipociti, rimodellamento delle gocce lipidiche e biologia degli adipociti bruni/beige
• Farmacologia del recettore β3-adrenergico (indiretta) — la dipendenza dell'AOD-9604 dal β3-AR (in alcune ricerche pubblicate) lo rende utile come sonda indiretta delle vie lipolitiche accoppiate al β3-AR, insieme agli agonisti diretti del β3-AR (CL-316,243, mirabegron)
• Ricerca su roditori con obesità indotta da dieta (DIO) — protocolli di dosaggio pubblicati di 4–8 settimane (100–1.000 µg/kg/d SC) in topi e ratti DIO sono stati riportati per ridurre la massa grassa senza influenzare la massa magra o i livelli di IGF-1; strumento di ricerca standard per il componente “solo lipolitico” della farmacologia della perdita di grasso
• Ricerca sulla cartilagine/chondrociti — utilizzato in modelli pubblicati di osteoartrite in vitro su chondrociti e piccoli animali per la valutazione condroprotettiva; indicazione di ricerca secondaria a seguito della sospensione del programma sull'obesità
• Farmacologia comparativa vs HGH 191AA e Frammento HGH 176-191 — confronti testa a testa pubblicati di AOD-9604 vs HGH a lunghezza intera e il frammento non stabilizzato 176-191 hanno caratterizzato i profili differenziali di legame al GHR, induzione di IGF-1 e lipolitici; AOD-9604 si colloca all'estremo “solo lipolitico, nessun asse di crescita” di questo spettro
• Ricerca sulla stabilità plasmatica e resistenza alle proteasi — l'emivita di 4 minuti rende AOD-9604 un composto di riferimento utile per la ricerca sulla resistenza alle proteasi; nuovi analoghi modificati (stabilizzati con PEG, fusione frammento-Fc, modifiche alternative del cappuccio N-terminale) sono confrontati con AOD-9604 nella ricerca di sviluppo in fase iniziale

Per un contesto più ampio sui peptidi di ricerca sull'asse HGH e sulla perdita di grasso in questo catalogo, vedere Frammento HGH 176-191 (il frammento genitore non stabilizzato — confronto diretto), HGH 191AA (la molecola genitore a lunghezza intera — per farmacologia comparativa), Tesamorelin (analogo GHRH — stimolazione dell'asse HGH a monte), Sermorelin (analogo GHRH 1-29), e MOTS-c (peptide metabolico derivato dai mitocondri). Esplora l'intero catalogo di peptidi e composti di ricerca, o consulta il hub curato dei peptidi di ricerca per la perdita di grasso e peptidi di ricerca sull'ormone della crescita hubs.

Concentrazioni e Dosaggi Disponibili

MedsBase offre AOD-9604 in tre dimensioni di fiale liofilizzate calibrate sui tipici protocolli di ricerca in vitro e in vivo. Ogni concentrazione è disponibile in formati da 10 fiale o 20 fiale:

Tutte e tre le intensità sono la stessa entità chimica (AOD-9604 liofilizzato, ≥99% purezza HPLC, confermato da MALDI-TOF a 1815.1 Da). Il vial da 10 mg offre il costo più basso per mg per grandi protocolli in vivo (un singolo vial da 10 mg supporta circa 50 giorni di dosaggio a 200 µg/kg/d in un topo di 25 g, o circa 10 giorni a 1 mg/kg/d in un ratto di 30 g). I ricercatori dovrebbero determinare gli intervalli di dosaggio specifici dalla letteratura peer-reviewed appropriata al protocollo.

Come si confronta — AOD-9604 vs Frammento HGH 176-191

AOD-9604 e Frammento HGH 176-191 sono i due peptidi di ricerca del frammento C-terminale dell'HGH in questo catalogo, e si trovano molto vicini nello spettro struttura-funzione. AOD-9604 è l'analogo sviluppato da Metabolic Pharmaceuticals con l'estensione N-terminale della tirosina che aggiunge stabilità proteasica. Il frammento HGH 176-191 non stabilizzato manca della tirosina N-terminale e ha un'emivita leggermente più breve in coltura/in vivo, ma è altrimenti meccanicamente identico. I due composti sono spesso usati in modo intercambiabile negli elenchi dei fornitori — la differenziazione è importante per la ricerca farmacologica rigorosa, meno per il lavoro di stimolazione in coltura cellulare.

Per la ricerca focalizzata sulla rigorosa farmacologia dei frammenti di HGH in termini di struttura-funzione, AOD-9604 con il suo CAS registrato / origine nota è il riferimento più pulito. Per il lavoro esplorativo di lipolisi in vitro dove l'origine precisa ha meno importanza, Frammento HGH 176-191 è l'opzione più economica. Per la ricerca che necessita della completa farmacologia dell'HGH, compreso il coinvolgimento del recettore GH / asse IGF-1, vedere HGH 191AA.

Conservazione e ricostituzione

Prima della ricostituzione: conservare i flaconcini liofilizzati refrigerati a 2–8 °C nella confezione originale per lo stock di lavoro a breve termine. Per lo stoccaggio a lungo termine, congelare i flaconcini non aperti a −20 °C (stabile ≥36 mesi a −20 °C; ≥18 mesi a 2–8 °C). Il ponte disolfuro Cys7–Cys14 è stabile nello stato liofilizzato e durante la conservazione refrigerata breve. Proteggere dalla luce.

Procedura di ricostituzione: Iniettare acqua batteriostatica lungo la parete laterale del flaconcino (non direttamente sul panetto liofilizzato). Per un flaconcino da 2 mg, 1,0 mL di diluente produce una soluzione di lavoro a 2 mg/mL; 0,5 mL produce 4 mg/mL. Per un flaconcino da 5 mg, 1,0 mL produce 5 mg/mL; 2,5 mL produce 2 mg/mL. Per un flaconcino da 10 mg, 1,0 mL produce 10 mg/mL (il limite pratico di solubilità in tampone acquoso); 5,0 mL produce 2 mg/mL. L'AOD-9604 si scioglie rapidamente con un leggero agitamento a temperatura ambiente — tipicamente entro 15-30 secondi. Una volta ricostituito, conservare il flaconcino a 2-8 °C e utilizzare entro 30 giorni. Proteggere dalla luce. Evitare ripetuti cicli di congelamento-scongelamento del materiale ricostituito — il congelamento-scongelamento cumulativo rischia di causare disordine del legame disolfuro Cys7–Cys14 e aggregazione parziale. Scartare se compaiono torbidità, particelle o un marcato cambiamento di colore.

Domande frequenti

Qual è la differenza tra AOD-9604 e HGH Fragment 176-191?

AOD-9604 (CAS 221231-10-3) è il composto di ricerca registrato sviluppato da Metabolic-Pharmaceuticals con un'estensione N-terminale di tirosina che aggiunge stabilità proteasica amino-terminale al frammento parentale hGH 177–191. “Frammento HGH 176-191” (CAS 66004-57-7 secondo alcune fonti) è la versione precedente e non stabilizzata dello stesso peptide C-terminale dell'hGH. I due sono spesso usati in modo intercambiabile nel mercato dei peptidi da ricerca, ma strettamente parlando, la denominazione AOD-9604 identifica l'analogo registrato da Metabolic-Pharmaceuticals con la tirosina stabilizzante. Entrambi mancano del legame con il GHR e conservano l'attività lipolitica della regione C-terminale dell'hGH parentale. Consultare il COA per confermare a quale forma di sequenza corrisponde un determinato lotto.

No. L'AOD-9604 è un frammento sintetico di 16 aminoacidi dell'HGH che copre solo la regione lipolitica C-terminale (residui 176–191 + tirosina N-terminale). L'HGH nativo è la proteina completa di 191 aminoacidi. La differenza farmacologica più importante è che l'HGH a lunghezza completa si lega al recettore dell'ormone della crescita (GHR) e attiva l'asse JAK2/STAT5/IGF-1 — guidando gli ampi effetti promuoventi la crescita e metabolici dell'HGH — mentre l'AOD-9604 NON si lega al GHR e NON induce IGF-1. L'AOD-9604 conserva solo l'attività lipolitica/anti-lipogenica della molecola parentale. I due composti sono quindi meccanicamente distinti: HGH 191AA per la farmacologia completa dell'asse GH, AOD-9604 per la ricerca solo sulla lipolisi.

No. AOD-9604 è un frammento sintetico di 16 aminoacidi dell'HGH che copre solo la regione lipolitica C-terminale (residui 176–191 + Tyr N-terminale). Nativo HGH 191AA Lo studio di fase IIb sull'obesità di 28 settimane (~500 pazienti, completato da Metabolic Pharmaceuticals nel 2007) non ha raggiunto il suo endpoint primario di perdita di peso rispetto al placebo. Le ipotesi principali nelle analisi pubblicate successive sono: (1) l'emivita plasmatica molto breve (~4 minuti) limita l'esposizione cumulativa del recettore con una somministrazione SC una volta al giorno; (2) l'effetto lipolitico, sebbene reale negli esperimenti meccanicistici in vitro e acuti in vivo, potrebbe non tradursi in una perdita netta di massa adiposa nel contesto metabolico umano, dove la segnalazione anti-lipolitica compensatoria domina durante la somministrazione cronica; (3) la dose in vivo potrebbe essere stata insufficiente per superare il vincolo farmacocinetico. Il composto è stato riposizionato per la ricerca sull'osteoartrite dopo l'interruzione del programma sull'obesità.

Perché il trial di fase IIb sull'obesità ha fallito?

Lo studio di fase IIb sull'obesità della durata di 28 settimane (~500 pazienti, completato da Metabolic Pharmaceuticals nel 2007) non ha raggiunto il suo endpoint primario di perdita di peso rispetto al placebo. Le principali ipotesi nelle analisi pubblicate successive sono: (1) l'emivita plasmatica molto breve (~4 minuti) limita l'esposizione cumulativa del recettore con la somministrazione sottocutanea una volta al giorno; (2) l'effetto lipolitico, sebbene reale negli esperimenti meccanicistici in vitro e acuti in vivo, potrebbe non tradursi in una perdita netta di massa adiposa nel contesto metabolico umano, dove la segnalazione anti-lipolitica compensatoria domina durante la somministrazione cronica; (3) la dose in vivo potrebbe essere stata insufficiente per superare il vincolo farmacocinetico. Il composto è stato riposizionato per la ricerca sull'osteoartrite dopo l'interruzione del programma sull'obesità.

Quali intervalli di dosaggio pubblicati sono stati utilizzati nella ricerca sui roditori?

L'AOD-9604 non è attualmente nella Lista delle sostanze proibite WADA con il suo nome specifico. Tuttavia, la più ampia classe S2 (Ormoni peptidici, Fattori di crescita, Sostanze correlate e Mimetici) copre esplicitamente i frammenti dell'ormone della crescita e i "composti correlati all'asse GH", e la classificazione dell'AOD-9604 sotto questa categoria più ampia è stata oggetto di discussione regolatoria. I ricercatori che conducono ricerche su soggetti umani con AOD-9604 dovrebbero consultare direttamente la Lista delle sostanze proibite WADA attuale e le normative giurisdizionali applicabili piuttosto che fare affidamento sull'assenza di un nome specifico dalla lista.

Qual è lo status normativo WADA di AOD-9604?

AOD-9604 is not on the current WADA Prohibited List under its specific name. However, the broader S2 class (Peptide Hormones, Growth Factors, Related Substances and Mimetics) explicitly covers growth-hormone fragments and “GH-axis-related compounds,” and AOD-9604’s classification under this broader category has been the subject of regulatory discussion. Researchers conducting human-subject research with AOD-9604 should consult the current WADA Prohibited List and applicable jurisdictional regulations directly rather than relying on the absence of a specific name from the list.

Qual è la differenza tra AOD-9604 e gli agonisti β3-adrenergici diretti come il mirabegron?

Mirabegron e CL-316,243 sono diretto agonisti del recettore β3-adrenergico — piccole molecole che si legano al sito ortosterico del β3-AR e attivano la segnalazione Gs-cAMP. AOD-9604 è un indiretto attivatore del β3-AR (secondo alcune ricerche pubblicate) — l'attività lipolitica è attenuata dagli antagonisti del β3-AR, a supporto della dipendenza dal β3-AR, ma il legame diretto AOD-9604/β3-AR non è stato dimostrato in modo conclusivo. Per ricerche che richiedono una farmacologia del β3-AR direttamente definita, mirabegron o CL-316,243 sono gli strumenti preferiti. Per ricerche che necessitano della più ampia farmacologia del “frammento lipolitico dell'HGH” con il suo meccanismo non completamente caratterizzato, AOD-9604 è il riferimento canonico.

AOD-9604 può essere combinato con HGH 191AA, analoghi del GHRH o altri peptidi lipolitici nei protocolli di ricerca?

Sì — AOD-9604 agisce su un livello diverso della biologia dell'asse HGH rispetto alla forma a lunghezza intera HGH 191AA o agli analoghi del GHRH (Tesamorelin, Sermorelin), e le combinazioni sono comunemente utilizzate nelle ricerche pubblicate per distinguere i contributi puramente lipolitici dagli effetti più ampi dell'asse GH. Le combinazioni più pubblicate sono AOD-9604 + HGH 191AA (per verificare se il componente lipolitico si aggiunge o sottrae all'attività completa dell'HGH); AOD-9604 + MOTS-c (ricerca sulla perdita di grasso duale, meccanismi diversi); AOD-9604 + un analogo del GHRH (per verificare se il rilascio endogeno pulsatile di HGH combinato con il frammento lipolitico supera ciascuno dei due da solo). Ricostituire ciascuno separatamente e seguire le regole di conservazione specifiche di ogni composto.

Perché AOD-9604 è talvolta indicato come 1815.1 Da e talvolta come 1817 Da?

La discrepanza riflette la differenza tra massa monoisotopica (1815.1 Da, calcolata dall'isotopo più abbondante di ogni atomo) e massa molecolare media (1817.1 Da, calcolata dalla massa media ponderata degli isotopi naturali di ogni atomo). Entrambe sono corrette per la stessa molecola. La spettrometria di massa MALDI-TOF tipicamente riporta la massa monoisotopica per peptidi di queste dimensioni; la letteratura più vecchia e alcuni fornitori riportano la massa media. Per scopi di COA, il valore di 1815.1 Da è il riferimento canonico Sigma-Aldrich.

Altri peptidi di ricerca per lo studio dell'asse HGH e della perdita di grasso

• Frammento HGH 176-191 — Frammento genitore non stabilizzato — fratello meccanicistico diretto, lipolisi simile disaccoppiata dal GHR
• HGH 191AA — Molecola genitore a lunghezza intera — per farmacologia comparativa con coinvolgimento dell'asse GH
• Tesamorelin — Analoghi del GHRH — stimolazione a monte dell'asse HGH
• Sermorelin — Analoghi del GHRH 1-29 — ricerca sull'HGH endogeno ipofisario
• MOTS-c — Peptide metabolico derivato dai mitocondri — ricerca sulla perdita di grasso con meccanismo alternativo
• BAC Water (Acqua Batteriostatica) — Necessario per ricostituire qualsiasi flaconcino liofilizzato — diluente sterile, conservato con alcol benzilico 0,9%

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