GDF-8 (Miostatina)

📦 Ogni ordine è coperto dalla nostra Politica di Garanzia di Rispedizione — se il tuo pacco non arriva entro 20 giorni lavorativi, lo rispediamo.

Cos'è la GDF-8 (Miostatina)?

GDF-8 (Fattore di crescita/differenziazione 8), comunemente nota come myostatin, è un membro della superfamiglia del fattore di crescita trasformante beta (TGF-β) e il principale regolatore fisiologico negativo della massa muscolare scheletrica. È stata caratterizzata per la prima volta da McPherron, Lawler e Lee (Nature 1997) come una proteina secreta la cui disattivazione mirata nei topi produceva animali con una massa muscolare scheletrica da due a tre volte maggiore rispetto ai controlli wild-type. Lo stesso gene è stato rapidamente identificato come la causa del fenotipo “doppia muscolatura” nei bovini Belgian Blue e Piedmontese, del fenotipo Bully Whippet nei levrieri da corsa e di un caso umano documentato di ipermuscolarità infantile marcata (Schuelke et al., NEJM 2004) — tutti portatori di mutazioni MSTN con perdita di funzione.

La miostatina matura è generata dal processamento post-traduzionale di una preproteina di 375 amminoacidi: il peptide segnale viene rimosso durante la secrezione, quindi il prodominio (~243 aa) viene scisso dalle proteasi furin, rilasciando la miostatina matura C-terminale attiva di 109 amminoacidi. La forma attiva è un omodimero di due catene monomeriche mature legate covalentemente da un legame disolfuro intermolecolare, con una massa apparente di circa 25,8 kDa su SDS-PAGE non riducente. La proteina adotta la struttura canonica a nodo cistina TGF-β e lega il recettore dell'attivina di tipo IIB (ActRIIB) con alta affinità per avviare la segnalazione mediata da Smad. Il GDF-8 ricombinante è fornito come polvere liofilizzata ad alta purezza per la ricostituzione con acqua batteriostatica. La miostatina è dalla FDA, EMA, MHRA o da qualsiasi altro importante regolatore per uso terapeutico umano. Il DSIP di grado di ricerca venduto qui è fornito dalla FDA, EMA, MHRA o qualsiasi altro importante regolatore per uso terapeutico umano. Il GDF-8 di grado di ricerca venduto qui è fornito solo per uso di ricerca in laboratorio e non è destinato alla somministrazione umana o veterinaria.

Meccanismo d'azione — Segnalazione ActRIIB e l'asse Smad2/Smad3

Ciò che rende il GDF-8 distintivo dal punto di vista meccanicistico tra i ligandi della superfamiglia TGF-β è il suo ruolo dominante come freno tonico sulla crescita muscolare attraverso una cascata di segnalazione ben caratterizzata in tre fasi documentata nella ricerca pubblicata:

• Legame del recettore ActRIIB e reclutamento del recettore di tipo I — L'omodimero di miostatina matura lega il recettore dell'attivina di tipo IIB (ActRIIB) sulla superficie delle fibre muscolari scheletriche e di altri tipi cellulari. ActRIIB è una serina/treonina chinasi costitutivamente attiva che, una volta legata alla miostatina, recluta e trans-fosforila i recettori di tipo I ALK4 (ActRIB) e ALK5 (TβRI). La stechiometria ligando-recettore è un eterotetramero 2:2:2 nel complesso attivo. La delezione di ActRIIB produce un fenotipo simile alla delezione della miostatina, confermando l'identità del recettore.
• Fosforilazione di Smad2/Smad3 e traslocazione nucleare — I recettori di tipo I ALK4/ALK5 fosforilati fosforilano gli Smad regolati dal recettore — specificamente Smad2 e Smad3 nel percorso della miostatina. Fosfo-Smad2/Smad3 formano un complesso eteromerico con Smad4 (Smad comune) e si traslocano nel nucleo, dove legano gli elementi di legame Smad nei promotori dei geni target e reclutano cofattori trascrizionali. Il percorso Smad è l'output di segnalazione dominante per la miostatina nel muscolo scheletrico.
• Effetti trascrizionali a valle — upregolazione di atrogin-1/MuRF1 e soppressione della sintesi proteica — Il complesso Smad nucleare coordina un programma trascrizionale che promuove l'atrofia muscolare attraverso tre meccanismi convergenti: induzione degli atrogeni ligasi dell'ubiquitina (atrogin-1 / Fbxo32 e MuRF1 / Trim63) per accelerare la degradazione proteica; inibizione della sintesi proteica mediata da Akt/mTOR attraverso il cross-talk con l'asse IGF/insulina; e soppressione dei fattori regolatori miogenici (MyoD, miogenina) per rallentare la riparazione guidata dalle cellule satelliti. L'effetto netto è una ridotta accrescimento proteico muscolare e, a dosi elevate o esposizione cronica, atrofia franca.

È importante per il disegno della ricerca che il GDF-8 agisca come un inibitore tonico nelle condizioni fisiologiche — la massa muscolare è regolata dall'equilibrio tra tono di miostatina (atrofico) e segnalazione IGF/Akt/mTOR (anabolico). Questo è il motivo per cui Follistatin 344 (un antagonista della miostatina/attivina) e il GDF-8 ricombinante (l'agonista stesso) sono entrambi utilizzati nella ricerca muscolare — l'antagonista rimuove il freno, mentre il ligando ricombinante è lo strumento sperimentale che quantifica quanto forte è il freno e valida l'attività dell'antagonista nei saggi di legame al recettore e nelle cellule reporter.

Applicazioni della Ricerca Pubblicata

La GDF-8 ricombinante è utilizzata in contesti di ricerca di laboratorio che studiano:

• Ricerca sull'atrofia e deperimento muscolare — saggi di atrofia in vitro su miotubi, preparazioni muscolari ex vivo, somministrazione in vivo per indurre fenotipi di atrofia riproducibili per studiare strategie di intervento (McPherron et al., Nature 1997; Lee, Annu Rev Cell Dev Biol 2004)
• Validazione di antagonisti della miostatina — saggi di affinità legante, saggi di potenza di anticorpi neutralizzanti, saggi di occupazione recettoriale per programmi di scoperta di farmaci mirati alla via della miostatina; strumento di ricerca canonico per la validazione follistatina 344, proteine di fusione solubili ActRIIB-Fc e anticorpi anti-miostatina
• Ricerca sulla via di segnalazione Smad2/Smad3 — cinetica di fosforilazione di Smad, imaging di traslocazione nucleare, saggi reporter con elementi leganti Smad, interazione con altri membri della via del TGF-β
• Ricerca sulla trascrizione degli atrogeni — analisi del promotore di atrogina-1 (Fbxo32) e MuRF1 (Trim63), attività ubiquitina-proteasoma, interazione con l'asse autofagico
• Modelli di cachessia e sarcopenia — modelli di cachessia in roditori portatori di tumore, sarcopenia in topi anziani, atrofia indotta da denervazione — GDF-8 ricombinante utilizzato per amplificare o riprodurre il fenotipo di deperimento
• Ricerca cardiaca e su altri tessuti — la miostatina è espressa a livelli più bassi nel cuore, nel tessuto adiposo e in altri tessuti; la ricerca pubblicata indaga gli effetti del GDF-8 in modelli di ipertrofia dei cardiomiociti e nella biologia del tessuto adiposo
• Ricerca comparativa sulla superfamiglia TGF-β — confronto con il GDF-11 strettamente correlato (90% di identità di sequenza nel dominio maturo) e l'activina A (che si lega allo stesso sistema recettoriale); analisi meccanicistica della selettività del recettore
• Abbinamento di farmacologia inversa con Follistatina 344 — co-somministrazione con Follistatin 344 come braccio antagonista consente la quantificazione diretta della stechiometria di legame miostatina/antagonista e il recupero dell'atrofia indotta da GDF-8 nei modelli di ricerca.

Per un contesto più ampio su dove si colloca il GDF-8 nel panorama della ricerca anabolica/muscolare, vedere Follistatin 344 come antagonista canonico della miostatina, IGF-1 LR3 per il braccio anabolico del pathway opposto (agonismo diretto di IGF-1R), e TB-500 per la ricerca sul recupero muscolare e tissutale sistemico. Esplora l'intera catalogo di peptidi da ricerca per composti correlati.

Concentrazioni e Dosaggi Disponibili

MedsBase offre GDF-8 ricombinante (Miostatina) in flaconcini liofilizzati da 1 mg. Il flaconcino è disponibile in confezioni da 10 o 20 flaconcini con istruzioni complete per la ricostituzione:

GDF-8 è una proteina ricombinante omodimerica di ~25,8 kDa fornita con una purezza ≥95% in HPLC. Il formato in flaconcino da 1 mg copre il tipico range di dosaggio per la ricerca: le concentrazioni di lavoro nanomolari per i saggi di legame in vitro e i test su cellule reporter consumano piccole frazioni di un flaconcino; la somministrazione in vivo su modelli roditori utilizza dosi di microgrammi per iniezione che consumano più flaconcino per protocollo.

Confronto — GDF-8 (Miostatina) vs Follistatina 344

GDF-8 ricombinante e Follistatin 344 costituiscono una coppia di farmacologia inversa: GDF-8 è il ligando e Follistatina 344 è la proteina ad alta affinità che lo sequestra. Sono comunemente accoppiati nella ricerca perché la funzione dell'antagonista può essere quantificata solo in relazione al ligando. La relazione è analoga ad altre coppie inverse ben note in farmacologia (ad esempio, agonista + antagonista dello stesso recettore) ma a livello di legame ligando-proteina piuttosto che a livello recettoriale.

Nella progettazione della ricerca muscolare, la coppia viene utilizzata insieme in tre modi principali: (1) misurazione dell'affinità di legame (risonanza plasmonica di superficie, ELISA, calorimetria a titolazione isotermica) dell'interazione follistatina-miostatina; (2) saggi cellulari di atrofia/recupero in cui GDF-8 induce atrofia dei miotubi e il trattamento combinato con follistatina viene testato per il recupero; e (3) validazione in vivo in cui GDF-8 amplifica un fenotipo di deperimento che la somministrazione combinata di follistatina attenua. Le due proteine sono complementari dal punto di vista meccanicistico e raramente studiate in isolamento.

Conservazione e ricostituzione

Prima della ricostituzione: conservare le fiale liofilizzate refrigerate a 2–8 °C nella confezione originale per scorte di lavoro a breve termine. Per lo stoccaggio a lungo termine non aperto, congelare a −20 °C. Il GDF-8 liofilizzato è stabile in refrigerazione fino a 12 mesi e a −20 °C fino a 24 mesi — un periodo leggermente più breve rispetto ai piccoli peptidi sintetici perché il dimero ricombinante più grande legato da disolfuro è più suscettibile a misfolding e aggregazione nel tempo. Evitare cicli di congelamento-scongelamento sulla polvere liofilizzata.

Procedura di ricostituzione: iniettare acqua batteriostatica lungo la parete laterale del flaconcino (non direttamente sul panello liofilizzato). Per un flaconcino da 1 mg, 1,0 mL di acqua batteriostatica producono una concentrazione di lavoro di 1 mg/mL. Agitare delicatamente — non not conservare refrigerato a 2–8 °C e utilizzare entro 30 giorni per una stabilità ottimale. Non congelare la soluzione ricostituita — le proteine dimeriche ricombinanti sono particolarmente sensibili alla denaturazione da congelamento-scongelamento, che produce aggregazione e perdita di attività di legame al recettore. Scartare qualsiasi fiala che presenti torbidità, precipitato o scolorimento. Per saggi di affinità di legame che richiedono una calibrazione precisa della risposta alla dose, utilizzare soluzione appena ricostituita entro 7 giorni per i risultati più riproducibili.

Dopo la ricostituzione: conservare in frigorifero a 2–8 °C e utilizzare entro 30 giorni per una stabilità ottimale. Non congelare la soluzione ricostituita — le proteine dimeriche ricombinanti sono particolarmente sensibili alla denaturazione da congelamento-scongelamento, che provoca aggregazione e perdita dell'attività legante il recettore. Scartare qualsiasi flacone che presenti torbidità, precipitato o alterazioni cromatiche. Per saggi di affinità di legame che richiedono una calibrazione precisa della risposta alla dose, utilizzare la soluzione ricostituita entro 7 giorni per ottenere risultati più riproducibili.

Domande frequenti

A cosa serve il GDF-8 (Miostatina) nella ricerca?

Il GDF-8 ricombinante è utilizzato nella ricerca di laboratorio come agonista canonico della via della miostatina — rappresenta lo strumento sperimentale per indurre fenotipi riproducibili di atrofia muscolare, caratterizzare la segnalazione Smad2/Smad3 e validare gli antagonisti della miostatina (inclusi Follistatin 344 e proteine di fusione ActRIIB-Fc), e quantificando la stechiometria di legame nei saggi farmacologici. Non viene utilizzato per “migliorare” nulla nei modelli di ricerca — è il regolatore negativo che i ricercatori vogliono comprendere e infine inibire. Il GDF-8 di grado ricerca venduto qui è not approvato dalla FDA ed è fornito esclusivamente per uso di ricerca in laboratorio.

In cosa differisce il GDF-8 dal GDF-11?

Il GDF-8 (miostatina) e il GDF-11 condividono circa il 90% di identità aminoacidica nel dominio maturo e legano lo stesso recettore ActRIIB con affinità comparabile. I ruoli funzionali sono parzialmente sovrapposti ma distinti nella distribuzione tissutale: il GDF-8 è espresso prevalentemente nel muscolo scheletrico ed è il regolatore dominante della massa muscolare; il GDF-11 è espresso più ampiamente ed è studiato in contesti cardiaci, neurali ed ematopoietici. La stretta somiglianza sequenziale rende lo sviluppo di antagonisti selettivi un obiettivo principale della ricerca attuale.

Qual è la dose tipica di GDF-8 nella ricerca?

I protocolli preclinici pubblicati utilizzano tipicamente concentrazioni di lavoro di 10–100 ng/mL per esperimenti di coltura cellulare in vitro (saggi di atrofia di miotubi, saggi su cellule reporter, studi di legame) e 0,1–10 mcg per somministrazione per protocolli di induzione di atrofia in roditori in vivo. Una fiala da 1 mg ricostituita con 1,0 mL di acqua batteriostatica produce 1 mg/mL — la diluizione in PBS o terreno di coltura fornisce soluzioni di lavoro nanomolari per l'uso in vitro.

Il GDF-8 è approvato dalla FDA?

No. Il GDF-8/miostatina non è approvato dalla FDA, EMA, MHRA o da qualsiasi altro importante regolatore per uso terapeutico umano. La ricerca sulla via della miostatina ha prodotto antagonisti in fase clinica (anticorpi anti-miostatina, ActRIIB-Fc solubile, terapia genica con follistatina), alcuni dei quali hanno raggiunto fasi avanzate di sperimentazione per distrofia muscolare e sarcopenia, ma il GDF-8 ricombinante stesso non è un terapeutico. Tutto il GDF-8 venduto da fornitori per uso esclusivo in ricerca è destinato a indagini di laboratorio e non deve essere somministrato agli esseri umani.

Is GDF-8 FDA approved?

No. GDF-8 / miostatina non è approvato dalla FDA, EMA, MHRA o da qualsiasi altro importante ente regolatorio per uso terapeutico umano. La ricerca sul pathway della miostatina ha prodotto antagonisti in fase clinica (anticorpi anti-miostatina, ActRIIB-Fc solubile, terapia genica con folistatina), alcuni dei quali hanno raggiunto studi avanzati per la distrofia muscolare e la sarcopenia, ma il GDF-8 ricombinante stesso non è un terapeutico. Tutto il GDF-8 venduto da fornitori per uso esclusivamente di ricerca è destinato a indagini di laboratorio e non deve essere somministrato agli esseri umani.

Come deve essere conservato il GDF-8?

Flaconcini liofilizzati: refrigerati a 2–8 °C per scorte di lavoro a breve termine, o −20 °C per lo stoccaggio a lungo termine di flaconcini non aperti. Soluzione ricostituita: refrigerata a 2–8 °C, utilizzare entro 30 giorni per protocolli generali o entro 7 giorni per saggi di affinità di legame che richiedono una calibrazione precisa. Non congelare la soluzione ricostituita — le proteine dimeriche ricombinanti sono particolarmente sensibili alla denaturazione da congelamento-scongelamento. Proteggere sempre dalla luce diretta. Si consiglia l'uso di una proteina carrier (BSA allo 0,1%) per diluizioni di lavoro inferiori a 100 mcg/mL.

Come si ricostituisce il GDF-8?

Seguire la procedura di ricostituzione sopra indicata. Aggiungere acqua batteriostatica lungo la parete laterale del flaconcino (non direttamente sulla polvere liofilizzata), agitare delicatamente e attendere 5–10 minuti per la completa dissoluzione. Non not agitare vigorosamente il flaconcino — un'agitazione vigorosa può interrompere il legame disolfuro intermolecolare e degradare l'attività. Una soluzione correttamente ricostituita è limpida e incolore, senza particelle visibili. Per un flaconcino da 1 mg + 1,0 mL di diluente, la concentrazione di lavoro è di 1 mg/mL.

Perché la specifica di purezza è del 95% anziché del 99%?

Le proteine ricombinanti come il GDF-8 non possono raggiungere lo standard di purezza ≥99% in HPLC tipico dei piccoli peptidi sintetici a causa dell'eterogeneità intrinseca di qualsiasi sistema di espressione ricombinante — intermedi di ripiegamento e forme di disolfuro-isomero appaiono come picchi correlati in HPLC che non sono impurità ma isoforme della proteina target. Una purezza ≥95% in HPLC è la specifica standard di grado ricerca per il GDF-8 e proteine dimeriche ricombinanti simili legate da disolfuro. L'SDS-PAGE mostra tipicamente la banda prevista di ~25,8 kDa in condizioni non riducenti e il monomero di ~12,9 kDa in condizioni riducenti.

Quali dosaggi sono disponibili su MedsBase?

MedsBase offre GDF-8 ricombinante (Miostatina) in flaconcini liofilizzati da 1 mg. Il flaconcino è disponibile in confezioni da 10 o 20 flaconcini. Tutti i flaconcini sono forniti con una purezza ≥95% in HPLC e un certificato di analisi disponibile su richiesta.

Il GDF-8 e la Follistatina 344 possono essere accoppiati nella ricerca?

Sì — questo è l'uso canonico. I due sono comunemente accoppiati in tre modi principali: (1) misurazione dell'affinità di legame tramite SPR, ELISA o ITC dell'interazione follistatina-miostatina; (2) saggi di atrofia/recupero basati su cellule in cui il GDF-8 induce atrofia dei miotubi e il co-trattamento con follistatina li recupera; e (3) studi in vivo in cui il GDF-8 amplifica un fenotipo di deperimento che la co-somministrazione di follistatina attenua. L'accoppiamento farmacologico inverso è fondamentale per la progettazione della ricerca sull'asse della miostatina.

Il GDF-8 causa effetti collaterali nella ricerca?

Il principale effetto on-target del GDF-8 ricombinante nei modelli di ricerca è l'atrofia muscolare — questa è l'azione farmacologica intenzionale, non un effetto collaterale. Risultati off-target includono effetti modesti sui tessuti cardiaco e adiposo, coerenti con l'espressione a livello inferiore di ActRIIB in quei compartimenti. A dosi molto elevate, possono essere osservati effetti più ampi correlati alla superfamiglia TGF-β su fibrosi e infiammazione, attribuibili al cross-talk recettoriale con le vie dell'attivina e del GDF-11.

Qual è l'emivita del GDF-8?

Nella ricerca preclinica, il GDF-8 ricombinante maturo ha un'emivita plasmatica di circa 2–4 ore dopo somministrazione endovenosa. Endogenamente, la miostatina matura circola legata al proprio prodominio (complesso latente) e alla follistatina/altre proteine leganti, il che prolunga notevolmente l'emivita tissutale effettiva. Per i protocolli di ricerca, il dimero attivo ricombinante viene somministrato senza il prodominio per fornire miostatina “libera” al recettore ActRIIB.

Perché il GDF-8 è stato originariamente scoperto?

GDF-8 è stato identificato da McPherron, Lawler e Lee alla Johns Hopkins (Nature 1997) utilizzando una strategia di screening con PCR degenerata progettata per individuare nuovi membri della superfamiglia TGF-β. La disruzione mirata nei topi ha prodotto animali con una massa muscolare scheletrica da due a tre volte maggiore rispetto ai controlli wild-type — un fenotipo straordinariamente chiaro che ha immediatamente stabilito la miostatina come il principale regolatore fisiologico negativo della crescita muscolare. Il collegamento con i fenotipi di “doppia muscolatura” presenti naturalmente nei bovini Belgian Blue e nei cani Whippet è stato stabilito entro pochi mesi, e un caso di mutazione MSTN nell'uomo è stato pubblicato sul NEJM nel 2004.

Quanto tempo impiega GDF-8 a mostrare effetti nella ricerca preclinica?

Gli effetti in-vitro sulla fosforilazione di Smad2/Smad3 sono rilevabili entro pochi minuti dall'esposizione cellulare. L'atrofia delle miotubi negli assay basati su cellule è misurabile entro 24–72 ore. I fenotipi di atrofia in-vivo nei modelli roditori si sviluppano nell'arco di 1–4 settimane di somministrazione regolare, con cinetiche che dipendono dalla dose, dalla via di somministrazione e dalla linea di base della massa muscolare dell'organismo modello.

Posso ordinare GDF-8 per la spedizione internazionale?

Sì. MedsBase spedisce GDF-8 in tutto il mondo dalla nostra rete dedicata di spedizione di peptidi. Gli ordini contenenti solo peptidi si qualificano per il nostro servizio di spedizione dedicato ai peptidi. Tutti gli ordini vengono spediti in imballaggi a temperatura controllata con tracciamento completo e sono coperti dalla nostra Politica di Garanzia di Rispedizione.

Altri Peptidi per la Ricerca Anabolica, Muscolare e sull'Asse della Crescita

• Follistatin 344 — Proteina legante antagonista della miostatina/activina — la coppia di farmacologia inversa a GDF-8
• IGF-1 LR3 — Analogio ricombinante di IGF-1 a lunga arginina — stimolo anabolico via opposta attraverso IGF-1R
• TB-500 (Thymosin Beta-4) — Frammento di guarigione sistemico — ricerca sul recupero muscolare e cardiaco
• CJC-1295 con DAC — Analogico GHRH a lunga durata — ricerca sull'asse dell'ormone della crescita
• Sermorelin — Analogico GHRH(1-29) a più breve durata — ricerca sui picchi naturali di GH

Approfondimenti

Altre opzioni in Peptidi

Classificate in base al volume di ordini recenti su MedsBase — ciò che scelgono altri clienti in questa categoria.

BPC-157

US$115.00 – US$705.00Preisspanne: US$115.00 bis US$705.00

Retatrutide

US$310.00 – US$6,515.00Preisspanne: US$310.00 bis US$6,515.00

BAC Water (Acqua Batteriostatica)

US$50.00 – US$150.00Preisspanne: US$50.00 bis US$150.00

NAD⁺

US$210.00 – US$1,975.00Preisspanne: US$210.00 bis US$1,975.00