Pikavastaus — Mikä on GDF-8 (myostatiini)?
GDF-8 (Growth/Differentiation Factor 8), jota kutsutaan myös myostatiiniksi, on rekombinantti TGF-β superheimon proteiini ja tärkein luonnollinen lihasmassan negatiivinen säätelijä. Toimintahäiriömutaatioiden aiheuttama tunnettu “kaksinkertainen lihaksistus” -fenotyyppi on havaittu hiirissä, nautoissa, koirissa ja yhdessä dokumentoidussa ihmistapauksessa. Julkaistuissa tutkimuksissa rekombinanttia GDF-8:aa käytetään polkustimulaatiotyökaluna: se aiheuttaa atrofiafenotyyppejä, validoi myostatiinin antagonisteja kuten follistatiini 344, ja kuvaa Smad2/Smad3-alajärjestelmän signaalointia. Toimitetaan 1 mg lyofiloituina pulloina vain laboratoriotutkimuskäyttöön.
📦 Jokainen tilaus on katettuna meidän Reshipment Assurance Policy -politiikkamme piiriin — jos lähetyksesi ei saavu 20 arkipäivässä, lähetämme uuden.
| Tekniset tiedot | Yksityiskohta |
|---|---|
| CAS-numero | Ei virallisesti rekisteröity kypsälle dimeerille (rekombinanttiproteiini). Koodattu MSTN-geenillä; UniProt O14793 |
| Tyyppi | Rekombinanttiproteiini (TGF-β superheimon ligandi; kypsä 109-aminohappoinen C-terminalinen disulfidisidoksella yhdistetty homodimeeri, joka on leikattu 375-aminohappoisesta esiproteiiniedeltäjästä) |
| Molekyylipaino | ~25,8 kDa (kypsä homodimeeri; ~12,9 kDa per monomeeriketju) |
| Rakenne | Kypsä 109-aminohappoinen monomeeri TGF-β superheimon kystiinisolmu-taitteella; kaksi monomeeria on kovalenttisesti sidottuna molekyylienvälisten disulfidisidosten kautta muodostaen biologisesti aktiivisen homodimeerin; reseptorisidospinnat sitoutuvat ActRIIB:hen |
| Muoto | Liofilisoitu rekombinanttiproteiini (valkoisesta kellertävään) |
| Puhdaus | ≥95 % (HPLC-varmistettu, COA saatavilla pyynnöstä) |
| Säilytys | Liofilisoitu: 2–8 °C (jääkaappi) työvarastoa varten; −20 °C avaamattomien pullojen pitkäaikaissäilytykseen. Uudelleenliuotettu: 2–8 °C, käytä noin 30 päivän kuluessa. Suojaa valolta. Älä jäädytä–sulata uudelleenliuotettua liuosta — rekombinanttiproteiinit ovat erityisen herkkiä jäädytyksen ja sulatuksen aiheuttamalle denaturoitumiselle. |
| Liukoisuus | Bakteriostaattinen vesi (suositeltu) tai steriili vesi lyhyemmille käyttöajalle. Kantajaproteiini (BSA, 0,1 %) valinnainen työliuosten laimentamiseen adsorptiohäviöiden minimoimiseksi. |
| Tutkimuskäyttö | Vain laboratoriotutkimuskäyttöön. Ei tarkoitettu ihmis- tai eläinlääketieteelliseen diagnostiseen tai terapeuttiseen käyttöön. |
Mikä on GDF-8 (myostatiini)?
GDF-8 (Growth/Differentiation Factor 8), yleisesti tunnettu nimellä myostatiiniksi, on transformoivan kasvutekijä beetaa (TGF-β) superheimon jäsen ja tärkein fysiologinen negatiivinen säätelijä luurankolihaksen massalle. Sen ensimmäisenä kuvailivat McPherron, Lawler ja Lee (Nature 1997) erittyneenä proteiinina, jonka kohdennettu häirintä hiirissä tuotti eläimiä, joiden luurankolihasmassa oli kaksi- kolminkertainen verrattuna villityyppisiin kontrollieläimiin. Sama geeni tunnistettiin nopeasti Belgian Blue- ja Piedmontese-rotujen nautojen “kaksinkertaisen lihaksen” fenotyypin, kilparotuisten greyhoundien Bully Whippet -fenotyypin ja yhden dokumentoidun ihmistapauksen, jossa oli huomattavaa imeväisiän lihaksen liikakasvua (Schuelke ym., NEJM 2004), syyksi – kaikissa tapauksissa oli kyse MSTN-geenin toimintahäiriöistä.
Kypsä myostatiini muodostuu 375-aminohappoista esiproproteiinin jälkitranslaatiokäsittelyn tuloksena: signaalipolypeptidi poistuu erityksen aikana, minkä jälkeen profragmentti (~243 aa) katkaistaan furiinproteaasien toimesta, jolloin vapautuu aktiivinen 109-aminohappoinen C-terminaalinen kypsä myostatiini. Aktiivinen muoto on kahden kypsän monomeriketjun homodimeeri, jotka on kovalenttisesti sidottu toisiinsa molekulienvälisellä disulfidisidoksella, ja sen näennäinen massa ei-pelkistävällä SDS-PAGE:lla on noin 25,8 kDa. Proteiini omaksuu TGF-β:n kystiinisolmu-taitoksen ja sitoutuu aktiiviinin tyyppi IIB-reseptoriin (ActRIIB) korkealla affiniteetilla aloittaen Smad-välitteisen signaalireitin. Rekombinanttia GDF-8:aa toimitetaan korkeapuhdistuksena lyofiloituna jauheena, joka liuotetaan bakteriostaattisella vedellä. Myostatiinia ei hyväksytty ei ole FDA:n, EMA:n, MHRA:n tai minkään muun merkittävän sääntelyviranomaisen hyväksymä ihmisterapeuttiseen käyttöön. Täällä myytävä tutkimuskäyttöön tarkoitettu GDF-8 toimitetaan vain laboratoriotutkimuskäyttöön eikä ole tarkoitettu ihmisille tai eläimille annettavaksi.
Toimintamekanismi – ActRIIB-signalointi ja Smad2/Smad3-akseli
Se, mikä tekee GDF-8:sta mekanistisesti erityisen TGF-β superheimon ligandeissa, on sen hallitseva rooli lihaksen kasvun säätelijänä hyvin kuvatun kolmivaiheisen signaalireitin kautta, joka on dokumentoitu julkaistuissa tutkimuksissa:
- ActRIIB-reseptorin sitoutuminen ja tyyppi I -reseptorin värväys — Kypsä myostatiinihomodimeeri sitoutuu aktiiviinintyyppi IIB-reseptoriin (ActRIIB) luurankolihassäikeiden ja muiden solutyyppien pinnalla. ActRIIB on jatkuvasti aktiivinen seriini/treoniinikinaasi, joka myostatiininsitoutumisen jälkeen värvää ja transfosforyloi tyyppi I -reseptorit ALK4 (ActRIB) ja ALK5 (TβRI). Ligandi-reseptori-stoikiometria aktiivisessa kompleksissa on 2:2:2 heterotetrameeri. ActRIIB-geenin poisto tuottaa fenotyypin, joka muistuttaa myostatiinigeenin poistoa, mikä vahvistaa reseptorin identiteetin.
- Smad2/Smad3-fosforylaatio ja siirtyminen tumaan — Fosforyloidut ALK4/ALK5-tyypin I-reseptorit fosforyloivat reseptorien säätelemät Smad-proteiinit — erityisesti Smad2 ja Smad3 myostatiinireitillä. Fosfo-Smad2/Smad3 muodostaa heteromeerisen kompleksin Smad4:n (yleinen Smad) kanssa ja siirtyy tumaan, jossa ne sitoutuvat kohdegeenien promoottoreiden Smad-sidoselementteihin ja värväävät transkriptioon osallistuvia kofaktoreita. Smad-reitti on myostatiinin hallitseva signaalivaste lihaskudoksessa.
- Alavirran transkriptiovaikutukset — atrogin-1/MuRF1:n yliregulaatio ja proteiinisynteesin tukahduttaminen — Tumassa oleva Smad-kompleksi koordinoi transkriptio-ohjelmaa, joka edistää lihaskudoksen atrofiaa kolmen rinnakkaisen mekanismin kautta: ubiquitinligaasi atrogeenien (atrogin-1 / Fbxo32 ja MuRF1 / Trim63) induktio proteiinien hajotuksen nopeuttamiseksi; Akt/mTOR-välitteisen proteiinisynteesin estäminen IGF/insuliini-akselin kanssa tapahtuvan ristikkäisvuorovaikutuksen kautta; sekä myogeenisten säätelytekijöiden (MyoD, myogeniini) tukahduttaminen satelliittisolujen ohjaaman korjauksen hidastamiseksi. Lopputuloksena on lihasproteiinien kertymisen väheneminen ja suurilla annoksilla tai pitkäaikaisessa altistuksessa selkeä atrofia.
Tutkimussuunnittelun kannalta tärkeää on, että GDF-8 toimii fysiologisissa olosuhteissa jatkuvana estäjänä — lihasmassa säätelyyn vaikuttavat myostatiinitonin (atrofinen) ja IGF/Akt/mTOR-signaloinnin (anabolinen) tasapaino. Tästä syystä Follistatiini 344 (myostatiinin/aktiviinin antagonisti) ja rekombinantti GDF-8 (agonisti itse) molemmat käytetään lihastutkimuksessa — antagonisti poistaa jarruvaikutuksen, kun taas rekombinantti ligandi on kokeellinen työkalu, joka määrittää jarruvaikutuksen voimakkuuden ja validoi antagonistin toiminnan reseptorisidonta- ja reportterisoluassayissa.
Julkaistut tutkimussovellukset
Rekombinanttia GDF-8:aa käytetään laboratoriotutkimuksessa seuraavien aiheiden tutkimiseen:
- Lihaskudoksen atrofia- ja surkastumistutkimus — in-vitro-myotubien atrofia-assayt, ex-vivo-lihasvalmisteet, in-vivo-annostelu toistettavien atrofiafenotyyppien aikaansaamiseksi interventiostrategioiden tutkimista varten (McPherron et al., Nature 1997; Lee, Annu Rev Cell Dev Biol 2004)
- Myostatiinantagonistin validointi — affiniteettimittaukset, neutraloivien vasta-aineiden tehoanalyysit, reseptori-occupancy -testit myostatiinireittiä kohdistavissa lääkehakuohjelmissa; kanoninen tutkimusväline validointiin follistatiini 344, liukenevat ActRIIB-Fc -fuusioproteiinit ja anti-myostatiini-vasta-aineet
- Smad2/Smad3 -signaalireitin tutkimus — Smad-fosforylaation kinetiikka, tumasiirtymäkuvantaminen, Smad-sitoutumiselementti-reporteritestit, vuorovaikutus muiden TGF-β -reitin jäsenten kanssa
- Atrogeenien transkriptiotutkimus — atrogin-1 (Fbxo32) ja MuRF1 (Trim63) -promoottorianalyysi, ubikitiini-proteasomiactiviteetti, autofagia-akselin vuorovaikutus
- Kakeksia- ja sarkopenia-mallit — kasvainkantavat jyrsijäkakeksiamallit, vanhenevien hiirten sarkopenia, denervaatiosta johtuva atrofia — rekombinanttia GDF-8:aa käytetään rappiomuotokuvan vahvistamiseen tai jäljittelyyn
- Sydän- ja muiden kudosten tutkimus — myostatiinia ilmenee alhaisemmilla tasoilla sydämessä, rasvakudoksessa ja muissa kudoksissa; julkaistu tutkimus selvittää GDF-8:n vaikutuksia kardiomyosyyttien hypertrofiamalleissa ja rasvakudosbiologiassa
- Vertailu TGF-β -superperheen tutkimukseen — vertailu läheisesti sukulaiseen GDF-11:een (90% sekvenssiidentiteetti kypsässä domeenissa) ja aktiiviini A:han (sitoutuu samaan reseptorijärjestelmään); reseptorivalikoimaisuuden mekanistinen erittely
- Käänteisfarmakologinen pariutuminen Follistatiini 344:n kanssa — yhteishoidossa Follistatiini 344 antagonistisena osana mahdollistaa myostatiini/antagonisti-sitoutumisen stoikiometrian suoran kvantifioinnin ja GDF-8-indusoituneen atrofian pelastamisen tutkimusmalleissa.
Laajemman kontekstin saamiseksi siitä, missä GDF-8 sijoittuu anaboliseen / lihas-tutkimuskenttään, katso Follistatiini 344 kanoniseksi myostatiinin antagonistiksi, IGF-1 LR3 vastakkaisen reitin anaboliseen osaan (suora IGF-1R-agonisti), ja TB-500 systemaattiseen lihas- ja kudosten palautumistutkimukseen. Selaa koko tutkimuspeptidien luettelo liittyvistä yhdisteistä.
Saatavat vahvuudet ja pitoisuudet
MedsBase tarjoaa rekombinanttia GDF-8:aa (Myostatiini) 1 mg lyofiloituina pulloina. Pullo on saatavilla 10-pulloisina tai 20-pulloisina pakkauksina täydellisine rekonstituointiohjeineen:
| Pullon vahvuus | Tyypillinen tutkimuskäyttötapaus | Pakkauskoot |
|---|---|---|
| 1 mg | Vakio tutkimusvahvuus — sitoutumiskokeet, atrofian indusointiprotokollat, antagonistin validointi | 10 tai 20 pulloa |
GDF-8 on noin 25,8 kDa rekombinantti homodimeeriproteiini, jonka HPLC-puhtaus on ≥95 %. 1 mg pullo kattaa tyypillisen tutkimusannosvälin: nanomolaariset työskentelypitoisuudet in-vitro -sitoutumis- ja reportterisolukokeissa kuluttavat pienen osan pullosta; in-vivo -annostelu jyrsijämalleissa käyttää mikrogramma-annoksia per injektio, jotka kuluttavat enemmän pulloa per protokolla.
Vertailu — GDF-8 (Myostatiini) vs Follistatiini 344
Rekombinantti GDF-8 ja Follistatiini 344 muodostavat käänteisfarmakologisen parin: GDF-8 on ligandi ja Follistatiini 344 on sen korkea-affiniteettinen sitoutumisproteiini, joka eristää sen. Niitä käytetään tutkimuksessa yhdessä, koska antagonistin toiminta voidaan kvantifioida vain ligandin suhteen. Tämä suhde muistuttaa muita tunnettuja käänteispareja farmakologiassa (esim. agonistin ja antagonistin samalle reseptorille), mutta ligandien ja sitoutumisproteiinien tasolla reseptoritason sijaan.
| Kriteeri | GDF-8 (Mystatiini) | Follistatiini 344 |
|---|---|---|
| Rooli lihasbiologiassa | Atrofinen ligandi (jarru) | Antagonistin sitoutumisproteiini (jarrujen poistaja) |
| Aktiivinen muoto | 109-aminohappoinen homodimeeri (~25,8 kDa) | 344-aa glykoproteiinimonomeeri (~37 kDa) |
| Reseptori tai kohde | ActRIIB (aktiviiinityyppi IIB -reseptori) | Eristää myostatiinin / aktiviiinin (ei reseptoria; suora ligandin sitoutuminen) |
| Alavirran signaalointi | Aktivoi Smad2/Smad3, atrogeenit | Estää Smad-aktivoitumisen poistamalla ligandin |
| Ensisijainen tutkimusrooli | Työkalu atrofiafenotyypin indusoimiseen / tutkimiseen | Työkalu atrofian kääntämiseen / estämiseen |
| Tyypillinen tutkimusannos | 10–100 ng/mL in vitro; 0,1–10 mcg in vivo | 10–100 mcg in vivo per annos |
| Pari | Käytetään yhdessä follistatiini 344:n kanssa sitoutumisstoikiometrian määrittämiseksi | Käytetään yhdessä GDF-8:n kanssa antagonistisen aktiivisuuden validoimiseksi |
Lihastutkimuksessa paria käytetään yhdessä kolmella pääasiallisella tavalla: (1) follistatiinin ja myostatiinin vuorovaikutuksen sitoutumisaffiniteetin mittaaminen (pintaplasmoniresonanssi, ELISA, isoterminen titrauskalorimetria); (2) solupohjaiset atrofia/pelastusassayt, joissa GDF-8 aiheuttaa myotubien atrofiaa ja follistatiinin yhteiskäsittelyä testataan pelastusvaikutuksen varalta; sekä (3) in-vivo-validoinnit, joissa GDF-8 vahvistaa rappeutumisfenotyyppiä, jota follistatiinin yhteisannos lievittää. Nämä kaksi proteiinia ovat mekanistisesti täydentäviä, eikä niitä juurikaan tutkita eristettyinä.
Säilytys ja liuotus
Ennen liuotusta: Säilytä liofilisoidut pullot jääkaapissa 2–8 °C:ssa alkuperäisessä pakkauksessa lyhytaikaista käyttövarastoa varten. Pitkäaikaista säilytystä varten pakastamattomia pulloja varten pakasta -20 °C:ssa. Liofilisoitu GDF-8 on stabiili jääkaapissa jopa 12 kuukautta ja -20 °C:ssa jopa 24 kuukautta – hieman lyhyemmän ajan kuin pienet synteettiset peptidit, koska suurempi rekombinanttinen disulfidisidoksella yhdistetty dimeeri on alttiimpi virheelliselle taittumiselle ja aggregaatiolle ajan myötä. Vältä liofilisoidun jauheen jäätymis-lämmityssyklejä.
Uudelleenliuotusmenettely: Ruiskuta bakteriostaattista vettä pullon sivuseinämää pitkin (ei suoraan liofilisoituun kakkualustaan). 1 mg pullossa 1,0 ml bakteriostaattista vettä tuottaa 1 mg/ml työskentelypitoisuuden. Kiertele varovasti — älä ei Säilytä jääkaapissa 2–8 °C:ssa ja käytä 30 päivän kuluessa optimaalisen stabiilisuuden saavuttamiseksi. Älä pakasta uudelleenliuotettua liuosta – rekombinanttiset dimeeriset proteiinit ovat erityisen herkkiä jäätymis-lämmitysdenaturaatiolle, joka aiheuttaa aggregaatiota ja reseptorisitoutumisaktiviisuuden menetystä. Hävitä kaikki sameat, sakkautuneet tai värjäytyneet pullot. Tiukkaa annosvastekalibraatiota vaativissa sitoutumisaffiniteettiassayissa käytä tuoreesti uudelleenliuotettua liuosta 7 päivän kuluessa toistettavimpiin tuloksiin.
Uudelleenliuotuksen jälkeen: Säilytä jääkaapissa 2–8 °C:ssa ja käytä 30 päivän kuluessa optimaalisen stabiilisuuden saavuttamiseksi. Älä jäädytä uudelleenliuotettua liuosta – dimeeriset rekombinanttivalkuaisaineet ovat erityisen herkkiä jäätymis-sulamisen aiheuttamalle denaturoitumiselle, joka johtaa aggregaatioon ja reseptorisitoutumisaktiivisuuden menetykseen. Hylkää mikä tahansa samean, sakkautuneen tai värjäytyneen näytteen. Sitoutumisaffiniteettianalyyseissä, jotka vaativat tarkkaa annos-vastekalibrointia, käytä tuoreesti uudelleenliuotettua liuosta 7 päivän kuluessa saadaksesi toistettavimmat tulokset.
Usein Kysytyt Kysymykset
Mihin GDF-8 (Myostatiiniä) käytetään tutkimuksessa?
ja ActRIIB-Fc-fuusioproteiinien) validointiin sekä sitoutumisstoikiometrian kvantifiointiin farmakologiaassayissa. Sitä ei käytetä minkään 'parantamiseen' tutkimusmalleissa – se on negatiivinen säätelijä, jota tutkijat haluavat ymmärtää ja lopulta estää. Täällä myytävä tutkimusluokan GDF-8 on Follistatiini 344 ja ActRIIB-Fc-fuusioproteiineja), sekä sitoutumisen stoikiometrian määrittämiseen farmakologisissa analyyseissa. Sitä ei käytetä minkään “parantamiseen” tutkimusmalleissa — se on negatiivinen säätelijä, jonka tutkijat haluavat ymmärtää ja lopulta estää. Täällä myytävä tutkimuskäyttöön tarkoitettu GDF-8 on ei FDA-hyväksytty ja sitä toimitetaan ainoastaan laboratoriotutkimuskäyttöön.
Miten GDF-8 eroaa Follistatin 344:sta?
Nämä kaksi muodostavat käänteisfarmakologisen parin. GDF-8 on aktiivinen myostatiiniligandi – lihaskasvun jarru, joka aiheuttaa atrofian Smad2/Smad3-signaloinnin kautta. Follistatiini 344 on korkea-affiniteettinen sitoutumisproteiini, joka eristää GDF-8:n ja aktiiviinin, poistaen ne reseptorikäytettävyydestä. Tutkimusmalleissa GDF-8 indusoi tai vahvistaa atrofiafenotyyppiä ja follistatiini 344 pelastaa sen. Näitä kahta käytetään säännöllisesti yhdessä sitoutumisaffiniteettitesteissä, solupohjaisissa pelastustesteissä ja in-vivo-validaatiotutkimuksissa myostatiinireitin antagonisteista.
Miten GDF-8 eroaa GDF-11:stä?
GDF-8 (myostatiini) ja GDF-11 jakavat noin 90 % aminohappojen identtisyyden kypsässä domeenissa ja sitoutuvat samaan ActRIIB-reseptoriin verrattavissa olevalla affiniteetilla. Toiminnalliset roolit osittain päällekkäiset, mutta eroavat kudospäässä: GDF-8 ilmentyy pääasiassa luurankolihaksessa ja on lihasmassan pääasiallinen säätelijä; GDF-11 ilmentyy laajemmin ja sitä tutkitaan sydän-, hermosto- ja verenmuodostuskonteksteissa. Läheinen sekvenssisamankaltaisuus tekee selektiivisten antagonistien kehittämisestä keskeisen tutkimuskohteen.
Mikä on tyypillinen GDF-8:n tutkimusannos?
Julkaistuissa esikliinisissä protokollissa käytetään tyypillisesti 10–100 ng/mL työskentelypitoisuuksia in-vitro soluviljelykokeissa (myotubien atrofiatestit, reportterisolutestit, sitoutumistutkimukset) ja 0,1–10 mcg per annos in-vivo jyrsijöiden atrofianinduktioprotokollissa. 1 mg:n pullo, joka on uudelleenliuotettu 1,0 mL:lla bakteriostaattista vettä, tuottaa 1 mg/mL – laimennus PBS:ään tai viljelyalustaan antaa nanomolaarisia työskentelyliuoksia in-vitro käyttöön.
Onko GDF-8 FDA-hyväksytty?
Ei. GDF-8 / myostatiinia ei ole hyväksynyt FDA, EMA, MHRA tai mikään muu merkittävä sääntelyelin ihmisterapeuttiseen käyttöön. Myostatiinireitin tutkimus on tuottanut kliinisessä vaiheessa olevia antagonisteja (anti-myostatiini vasta-aineet, liukoinen ActRIIB-Fc, follistatiinigeeniterapia), joista osa on edennyt myöhäisvaiheen kokeisiin lihasdystrofian ja sarkopenian hoidossa, mutta rekombinantti GDF-8 itse ei ole lääkeaine. Kaikki tutkimuskäyttöön tarkoitetut GDF-8:n toimittajat myyvät sitä vain laboratoriotutkimuksiin, eikä sitä tulisi antaa ihmisille.
Kuinka GDF-8 tulisi säilyttää?
Lyofiloituja pulloja: jääkaapissa 2–8 °C lyhytaikaista käyttövarastoa varten tai −20 °C pitkäaikaiseen säilytykseen avaamattomille pulloille. Uudelleenliuotettu liuos: jääkaapissa 2–8 °C, käytä 30 päivän kuluessa yleisissä protokollissa tai 7 päivän kuluessa tiukkaa kalibrointia vaativissa sitoutumisaffiniteettitesteissä. Älä jäädyttä uudelleenliuotettua liuosta – rekombinanttiset dimeeriset proteiinit ovat erityisen herkkiä jäätymis-sulatushajoamiselle. Suojaa aina suoralta valolta. Kantajaproteiinia (BSA 0,1 %) suositellaan työskentelylaimennuksille alle 100 mcg/mL.
Kuinka GDF-8 uudelleenliuotetaan?
Nouda yllä olevaa uudelleenliuotuskäyttöä. Lisää bakteriostaattista vettä pullon sivuseinämää pitkin (ei kuivakakkua päälle), huuhtele varovasti ja anna 5–10 minuuttia täydelliseen liukenemiseen. Älä ei ravista pulloa – voimakas ravistelu voi häiritä molekyylien välistä disulfidisidosta ja heikentää aktiivisuutta. Oikein uudelleenliuotettu liuos on kirkas ja väritön ilman näkyviä hiukkasia. 1 mg:n pullolle + 1,0 mL liuotinta työskentelypitoisuus on 1 mg/mL.
Miksi puhtausspecifikaatio on 95 % eikä 99 %?
Rekombinanttiproteiinit kuten GDF-8 eivät voi saavuttaa ≥99 % HPLC-puhtausstandardia, joka on tyypillinen pienille synteettisille peptideille, johtuen rekombinanttien ilmentysjärjestelmien luontaisesta heterogeenisuudesta – erilaiset taitteluvälituotteet ja disulfidi-isomeerimuodot näkyvät HPLC:ssä liittyvinä piikkeinä, jotka eivät ole epäpuhtauksia vaan kohdeproteiinin isomuotoja. ≥95 % HPLC-puhtaus on standarditutkimusluokan specificaatio GDF-8:lle ja vastaaville rekombinanteille disulfidisidoksilla yhdistetyille dimeeriproteiineille. SDS-PAGE näyttää tyypillisesti odotetun ~25,8 kDa:n juovan pelkistämättömissä olosuhteissa ja ~12,9 kDa:n monomeerin pelkistetyissä olosuhteissa.
Mitä vahvuuksia MedsBase pitää varastossaan?
MedsBase tarjoaa rekombinanttia GDF-8:aa (Myostatiini) 1 mg:n lyofiloituina pulloina. Pullo on saatavana 10 tai 20 pullon pakkauksina. Kaikki pullot toimitetaan ≥95 % HPLC-puhtaudella, ja analyysitodistus on saatavilla pyynnöstä.
Voiko GDF-8:aa ja Follistatiini 344:ää yhdistää tutkimuksessa?
Kyllä — tämä on kanoninen käyttötapaus. Näitä kahta yhdistetään säännöllisesti kolmella pääasiallisella tavalla: (1) follistatiinin ja myostatiinin vuorovaikutuksen sitoutumisaffiniteetin mittaaminen SPR-, ELISA- tai ITC-menetelmillä; (2) solupohjaiset atrofia/pelastusassayt, joissa GDF-8 aiheuttaa myotubien atrofiaa ja follistatiinin yhdistetty käyttö pelastaa tilanteen; sekä (3) in-vivo-tutkimukset, joissa GDF-8 vahvistaa rappeutumisfenotyyppiä, jota follistatiinin yhdistetty annostelu lieventää. Käänteisfarmakologinen pari on perustavanlaatuinen osa myostatiini-akselin tutkimussuunnittelua.
Aiheuttaako GDF-8 sivuvaikutuksia tutkimuksessa?
Rekombinantin GDF-8:n päätavoitevaikutus tutkimusmalleissa on lihasten atrofia — tämä on tarkoitettu farmakologinen vaikutus, ei sivuvaikutus. Off-target-vaikutuksia ovat lievät vaikutukset sydän- ja rasvakudoksiin, mikä on yhtäpitävää ActRIIB-reseptorin alhaisemman ilmentymisen kanssa näissä kudoksissa. Erittäin korkeilla annoksilla voidaan havaita laajempia TGF-β-superheimoon liittyviä vaikutuksia fibroosiin ja tulehdukseen, joita voidaan pitää reseptorien ristiviestinnän seurauksena aktiivisen ja GDF-11-signaloinnin kanssa.
Mikä on GDF-8:n puoliintumisaika?
Esikliinisessä tutkimuksessa rekombinantin kypsän GDF-8:n plasmassa puoliintumisaika on noin 2–4 tuntia intravenoosin annostelun jälkeen. Endogeenisesti kypsä myostatiini kiertää veressä sitoutuneena omaan prodomainiinsa (latentti kompleksi) sekä follistatiiniin/muihin sitoutumisproteiineihin, mikä pidentää merkittävästi sen kudospuoliintumisaikaa. Tutkimuskäytössä rekombinanttia aktiivista dimeeriä annostellaan ilman prodomainia, jotta “vapaa” myostatiini pääsee ActRIIB-reseptorille.
Miksi GDF-8 löydettiin alun perin?
GDF-8 tunnistettiin McPherronin, Lawlerin ja Leen toimesta Johns Hopkinsissa (Nature 1997) degeneroituneen PCR:n seulontastrategian avulla, jonka tavoitteena oli löytää uusia TGF-β-superheimon jäseniä. Kohdennetun häirinnän seurauksena hiirillä saatiin aikaan eläimiä, joiden luurangonlihakset olivat kaksi–kolme kertaa suuremmat kuin villityypin kontrollieläimillä — erittäin selkeä fenotyyppi, joka vakiinnutti välittömästi myostatiinin hallitsevaksi fysiologiseksi negatiiviseksi lihaskasvun säätelijäksi. Yhteys luonnossa esiintyviin “kaksinkertaisen lihaksen” fenotyyppeihin Belgian Blue -naudoissa ja whippet-koirissa vahvistettiin muutamassa kuukaudessa, ja MSTN-mutaatiotapaus ihmisissä julkaistiin NEJM:ssä vuonna 2004.
Kuinka kauan GDF-8:lla kestää näyttää vaikutuksia esikliinisessä tutkimuksessa?
In-vitro-vaikutukset Smad2/Smad3-fosforylaatioon voidaan havaita minuuteissa solujen altistumisen jälkeen. Myotubien atrofia solupohjaisissa assayissa on mitattavissa 24–72 tunnin kuluessa. In-vivo-atrofiafenotyypit jyrsijämalleissa kehittyvät 1–4 viikon säännöllisen annostelun aikana, ja kineettinen kehitys riippuu annoksesta, annostelutavasta sekä malliorganismin taustalla olevasta lihasmassasta.
Voinko tilata GDF-8:n kansainväliseen toimitukseen?
Kyllä. MedsBase toimittaa GDF-8-peptidit maailmanlaajuisesti omasta erikoistuneesta peptidien toimitusverkostostamme. Pelkistä peptideistä koostuvat tilaukset oikeuttavat erilliseen peptidien toimituspalveluumme. Kaikki tilaukset toimitetaan lämpötilanhallitussa pakkauksessa täydellä seurannalla ja ne kuuluvat Reshipment Assurance Policy -politiikkamme piiriin.
Muut peptidit anabolisten, lihas- ja kasvuakselitutkimuksien käyttöön
- Follistatiini 344 — Myostatiini/aktiviini-antagonistisidoksen proteiini — GDF-8:n käänteisfarmakologinen pari
- IGF-1 LR3 — Pitkä-arginiininen rekombinantti IGF-1-analoggi — vastakkaisen reitin anabolinen ärsyke IGF-1R:n kautta
- TB-500 (Thymosin Beta-4) — Systeeminen parantumisfragmentti — lihas- ja sydänparannustutkimus
- CJC-1295 DAC:lla — Pitkävaikutteinen GHRH-analogi — kasvuhormoniakselitutkimus
- Sermorelin — Lyhytvaikutteinen GHRH(1-29) analogi — luonnollinen GH-pulssitutkimus
Lisälukemista
📖 Tutustu myostatiinireittiin
Selaa koko tutkimuspeptidien luettelo, käänteisfarmakologisena parina Follistatiini 344 myostatiiniantagonistina reittipelastustutkimuksessa, IGF-1 LR3 suoran IGF-reseptorin anabolista tutkimusta varten, ja TB-500 systemaattiseen lihas- ja kudospalautumistutkimukseen.

























Arvostelut
Ei vielä arvosteluja