LL-37 (antimikrobiální peptid katelicidin)

📦 Každá objednávka je pokryta naší Zárukou opětovného odeslání — pokud vaše zásilka nedorazí do 20 pracovních dnů, přeposíláme ji.

Co je LL-37?

LL-37 je aktivní C-terminální 37-aminokyselinový peptid uvolněný proteolytickým štěpením lidského katelicidinového antimikrobiálního peptidu hCAP-18 — jediného produktu katelicidinového genu u lidí, kódovaného genem CAMP na chromozomu 3. Peptid získal své jméno podle prvních dvou zbytků (Leu-Leu) a své délky (37 zbytků). Patří do rodiny katelicidinů, vrozených obranných peptidů imunity hostitele, které se vyskytují u většiny obratlovců, a představuje centrální efektorovou molekulu v lidské katelicidinové větvi vrozené imunity spolu s rodinou defensinů.

Neaktivní proforma hCAP-18 je produkována v granulích neutrofilů, v epiteliálních površích (kožních keratinocytech, respiračním a střevním epitelu) a v menším množství makrofágy, NK buňkami, mastocyty, B-lymfocyty a γδ T-lymfocyty. Aktivace probíhá proteolytickým štěpením proteinázou-3 (v neutrofilech) nebo kallikreinem-5/kallikreinem-7 (v kůži), čímž se uvolňuje bioaktivní 37-mer, který v membránově-mimetických prostředích zaujímá výrazně amfipatickou α-helikální konformaci. Peptid nese při neutrálním pH čistý kladný náboj +6, s kationtovými zbytky lysinu a argininu koncentrovanými na jedné straně helixu a hydrofobními zbytky leucinu, fenylalaninu, isoleucinu a valinu na protilehlé straně — kanonická architektura “amfipatického α-helixu”, která umožňuje selektivní interakci se záporně nabitými mikrobiálními membránami.

LL-37 kombinuje dvě odlišné modality obrany hostitele v jediném peptidu. Jeho přímá antimikrobiální aktivita zahrnuje Gram-pozitivní bakterie (včetně methicilin-rezistentních S. aureus, MRSA), gramnegativní bakterie (včetně E. coli, K. pneumoniae, P. aeruginosa), obalené viry (HSV-1, chřipka, RSV), houby (Candida), a mikrobiální biofilmy. Jeho imunomodulační aktivita zahrnuje vazbu a neutralizaci bakteriálního lipopolysacharidu (LPS) a lipoteichoové kyseliny, chemotaxi neutrofilů/monocytů/T-lymfocytů/žírných buněk prostřednictvím receptoru podobného formylpeptidovému receptoru-1 (FPRL1/FPR2), modulaci TLR signalizace, potlačení LPS-indukovaných cytokinových bouří, indukci angiogeneze prostřednictvím FPRL1 signalizace na endoteliálních buňkách a stimulaci migrace keratinocytů při hojení ran. Dysregulace LL-37 se podílí na patogenezi psoriázy (kde nadbytek LL-37 tvoří komplexy s vlastní DNA a aktivuje plazmacytoidní dendritické buňky), aterosklerózy a některých nádorů. LL-37 není FDA, EMA, MHRA ani žádným jiným významným regulátorem pro terapeutické použití u lidí. Výzkumný DSIP prodávaný zde je dodáván schválen FDA, EMA, MHRA ani žádným jiným významným regulátorem pro terapeutické použití u lidí. Výzkumný LL-37 prodávaný zde je dodáván určen pouze pro laboratorní výzkum a není určen pro lidské ani veterinární podávání.

Mechanismus účinku — Narušení membrány + Imunomodulace

LL-37 působí prostřednictvím tří hlavních mechanismů popsaných v publikovaných studiích:

• Selektivní narušení mikrobiální membrány prostřednictvím vložení amfipatické α-helixy — V objemovém vodném roztoku je LL-37 převážně nestrukturovaný, ale při kontaktu s negativně nabitou mikrobiální membránou (bohatou na fosfatidylglycerol, kardiolipin, lipoteichovou kyselinu nebo LPS) se rychle skládá do amfipatické α-helixy. Kationtová strana interaguje s aniontovým povrchem membrány; hydrofobní strana se vkládá do lipidové dvojvrstvy. Při prahovém poměru peptidu k lipidu to vede k tvorbě toroidních pórů nebo k dezintegraci membrány ve stylu “koberce”, což depolarizuje mikrobiální buňku a narušuje esenciální transmembránové gradienty. Membrány savčích buněk jsou chráněny svou zwitteriontovou vnější vrstvou (fosfatidylcholin, sfingomyelin) a přítomností cholesterolu — což poskytuje určitou míru mikrobiální selektivity, která odlišuje AMP od široce cytotoxických detergentů.
• Neutralizace LPS a modulace dráhy TLR4 — LL-37 se přímo váže na bakteriální lipopolysacharid (LPS) s vysokou afinitou, čímž jej izoluje od receptorového komplexu TLR4 / MD-2 / CD14. Tím se blokuje aktivace NF-κB řízená LPS, snižuje se uvolňování TNF-α / IL-6 / IL-1β a chrání se hostitelská tkáň před cytokinovými bouřemi podobnými sepse během závažných gramnegativních infekcí. Stejná vlastnost činí z LL-37 výzkumný nástroj pro analýzu signalizace řízené LPS.
• Imunomodulace prostřednictvím FPRL1 (formylpeptidový receptor-like 1) a následné signalizace — LL-37 působí jako chemoatraktant pro neutrofily, monocyty a T-buňky prostřednictvím vazby na FPRL1 (FPR2), receptor spřažený s G-proteinem, který je široce exprimován na efektorových buňkách vrozené imunity. Stejný receptor na endoteliálních buňkách zprostředkovává proangiogenní účinek LL-37 — stimuluje proliferaci, migraci a tvorbu trubic endoteliálních buněk. Migrace keratinocytů během reepitelizace ran je také závislá na FPRL1. Peptid navíc interaguje s purinergními receptory P2X7 na makrofázích, což přispívá k modulaci inflamazomu.

Charakteristickým rysem biologie LL-37 je “meč vs štít” rovnováha: při nízkých koncentracích je peptid převážně imunomodulační a tkáňově ochranný, zatímco při vysokých lokálních koncentracích dominuje přímá membránově disruptivní aktivita. Toto koncentračně závislé funkční přepínání je jedním z důvodů, proč má LL-37 terapeuticko-výzkumný zájem jak v oblasti antimikrobiálních, tak v hojení ran, a proč je podrobná charakterizace dávkové odpovědi klíčová v jakémkoli in-vitro nebo in-vivo protokolu.

Publikované výzkumné aplikace

LL-37 se používá v laboratorním výzkumu, který zkoumá:

• Výzkum antimikrobiální rezistence — širokospektrální panely minimálních inhibičních koncentrací (MIC) proti MRSA, ESBL-produkujícím enterobakteriím, kmenům rezistentním na karbapenemy a biofilmům asociovaným s patogeny; benchmarkování vývojového kanálu AMP
• Výzkum biofilmu — testy prevence biofilmu, testy disruptace zavedeného biofilmu proti P. aeruginosa, S. aureus, a K. pneumoniae — důležité v kontextech výzkumu cystické fibrózy a chronických ran
• Výzkum LPS / sepse — testy neutralizace LPS, analýza signalizace TLR4, modely cytokinové bouře u septického šoku
• Výzkum hojení ran a kůže — testy migrace keratinocytů, modely uzavírání ran u dermálních fibroblastů a endotelu; jeden z hlavních výzkumných peptidů ve výzkumu hojení kožních ran
• Výzkum patogeneze psoriázy — analýza osy LL-37 / vlastní DNA / plazmacytoidních dendritických buněk (LL-37 je nadměrně exprimován v psoriatické kůži a tvoří komplexy s vlastní DNA, čímž narušuje toleranci prostřednictvím TLR9 v pDC)
• Výzkum aterosklerózy — LL-37 v makrofázích plaku, interakce s oxidovaným LDL, modely vaskulárního zánětu
• Výzkum onkologie — paradoxní pro- a protinádorové účinky v závislosti na typu nádoru (LL-37 má pro-proliferativní účinky u některých nádorů prostřednictvím FPRL1, u jiných má protinádorový účinek přímým narušením membrány nádorových buněk)
• Výzkum mechanismů vrozené imunity — signalizace FPRL1, modulace P2X7, biologie neutrofilních extracelulárních pastí (NET), indukce CAMP mediovaná vitaminem D

Pro širší kontext výzkumu vrozené imunity a hostitelských obranných peptidů viz KPV (protizánětlivý tripeptid odvozený od α-MSH), BPC-157 (pentadekapeptid opravy tkání s více cestami) a TB-500 (fragment Thymosinu Beta-4, široká oprava tkání). Prohlédněte si celý katalog výzkumných peptidů pro příbuzné sloučeniny.

Dostupné síly a koncentrace

MedsBase nabízí LL-37 v lyofilizovaných vialách po 5 mg. Dostupné v baleních po 10 nebo 20 vialách s úplným návodem na rekonstituci:

LL-37 je dodáván jako nemodifikovaná lineární 37-mer volná kyselina (žádná acylace, žádná PEGylace, žádný disulfidový můstek). Peptid je citlivý na adsorpci plastů – výzkumníci by měli pro skladování zásob a ředění používat nízkovazebné zkumavky. Pracovní koncentrace v publikovaných testech se pohybují od ~0,5 µg/mL v chemotaktických testech až po ~50 µg/mL v přímých antimikrobiálních testech.

Srovnání – LL-37 vs KPV

LL-37 a KPV se oba používají ve výzkumu vrozené imunity, ale fungují na zcela odlišných škálách a cílí na různé mechanismy. LL-37 je plný 37-residuový obranný peptid hostitele, který kombinuje přímou antimikrobiální membránovou destabilizaci s imunomodulací mediovanou FPRL1. KPV (lysin-prolin-valin) je 3-residuový C-terminální fragment α-melanocyt-stimulujícího hormonu (α-MSH), který působí jako cílený protizánětlivý a mírný antimikrobiální peptid prostřednictvím modulace melanokortinového receptorového systému.

Pro výzkum zaměřený na širokospektrální antimikrobiální aktivitu, narušení biofilmu nebo membránově-pórové mechanismy je LL-37 kanonickou referenční peptidovou sekvencí. Pro výzkum zaměřený na protizánětlivou signalizaci melanokortinové dráhy na buněčné úrovni, KPV je selektivnější nástroj. Viz také BPC-157 pro protizánětlivý výzkum zaměřený na opravu tkání a TB-500 pro široké benchmarkování opravy tkání.

Skladování a rekonstituce

Před rekonstituci: lyofilizované lahvičky skladujte v chladničce při 2–8 °C v původním obalu pro krátkodobé pracovní zásoby. Pro dlouhodobé skladování zmrazte neotevřené lahvičky při −20 °C. Lyofilizovaný LL-37 je stabilní v chladničce až 24 měsíců a při −20 °C až 36 měsíců. Vyhněte se cyklům zmrazování a rozmrazování lyofilizovaného prášku. Stejně jako všechny kationické AMP je LL-37 náchylný k adsorpci na plast — i malé ztráty do standardních polypropylenových zkumavek mohou zkreslit data dávkové odpovědi. Pro skladování zásob a sériové ředění používejte nízkovazebné zkumavky (silikonizované sklo, Protein LoBind nebo polypropylen předem potažený bovinním sérovým albuminem) v nízko-proteinových assay pufrech.

Postup rekonstituce: injektujte bakteriostatickou vodu po boční stěně lahvičky (ne přímo na lyofilizovaný koláč). Pro lahvičku 5 mg, 1,0 ml bakteriostatické vody poskytne pracovní koncentraci 5 mg/ml; 2,0 ml poskytne pracovní zásobu 2,5 mg/ml. Jemně zakružte — nešlehejte agresivně, protože pěnění zachycuje vzduch a může narušit skládání helixu. Nechte prášek plně rozpustit (obvykle 1–2 minuty) před odběrem. Pro aplikace citlivé na bakteriostatické látky (experimenty s buněčnými kulturami) rekonstituujte ve sterilní vodě nebo 0,01% kyselině octové. Po rekonstituci skladujte lahvičku při 2–8 °C a použijte do 14–28 dnů. Chraňte před světlem. Zlikvidujte, pokud se objeví zákal, částice nebo změna barvy.

Často kladené dotazy

Je LL-37 totéž co katelicidin?

LL-37 je aktivní C-terminální 37-aminokyselinový peptid uvolněný z lidského katelicidinu (neaktivní proforma hCAP-18, kódovaná genem CAMP). Katelicidin je rodové jméno a odkazuje na mnoho obratlovců; LL-37 je specifické jméno aktivního lidského katelicidinového peptidu. Další názvy, které můžete v literatuře vidět — CAP-18 a FALL-39 — odkazují na stejnou molekulu z různých historických názvových konvencí.

Jak se LL-37 liší od defensinů?

LL-37 a defensiny (α- a β-defensiny) jsou dvě hlavní skupiny savčích antimikrobiálních peptidů. Defensiny jsou menší, bohaté na cystein a mají strukturu β-skládaného listu stabilizovanou 3 disulfidovými vazbami. LL-37 je delší lineární kationtový peptid, který v membránovém prostředí vytváří amfipatickou α-helix bez disulfidových můstků. Obě třídy mají široké antimikrobiální účinky a imunomodulační funkce, ale fungují na strukturně odlišných mechanismech.

Jaká je typická účinná koncentrace LL-37 v antimikrobiálních testech?

Publikované minimální inhibiční koncentrace (MIC) pro LL-37 proti citlivým grampozitivním a gramnegativním patogenům se obvykle pohybují v rozmezí 1 až 32 µg/ml v závislosti na kmeni, iontové síle pufru a formátu testu (biofilm vs. planktonické buňky). Vyšší koncentrace (50–100 µg/ml) se běžně používají pro studie přímého narušení membrán a testy eradikace biofilmu. Imunomodulační parametry (chemotaxe, neutralizace LPS, migrace keratinocytů) obvykle využívají mnohem nižší koncentrace (0,5–10 µg/ml). Rozsah dávek vždy určujte na základě recenzované literatury vhodné pro váš konkrétní protokol.

Proč je adsorpce na plast důležitá pro LL-37?

Kationtové AMP jako LL-37 se mohou významně adsorbovat na standardní laboratorní nádobí z polypropylenu a polystyrenu, zejména v pufrech s nízkým obsahem proteinů. V literatuře jsou popsány ztráty 30–80 % při jediném přenosu do zkumavky u kationtových peptidů při nízkých koncentracích. To může vést k systematickému podhodnocení aktivity, zejména v ředicích řadách pro stanovení MIC. Používejte nízkovazebné zkumavky, předem potažené BSA, nebo přidejte do ředicích pufrů nosný protein podle potřeby vzhledem k typu testu.

Jak LL-37 rozlišuje mikrobiální a savčí membrány?

Selektivita vychází ze složení membrán. Mikrobiální membrány (zejména vnější membrány gramnegativních a cytoplazmatické membrány grampozitivních bakterií) jsou bohaté na negativně nabité lipidy (fosfatidylglycerol, kardiolipin, LPS, lipoteichovou kyselinu). Savčí cytoplazmatické membrány mají zwitteriontový vnější list (fosfatidylcholin, sfingomyelin) a vysoký obsah cholesterolu, který stabilizuje dvojvrstvu. Kationtová strana LL-37 preferenčně interaguje s negativně nabitým povrchem mikrobů; savčí membrána stabilizovaná cholesterolem je mnohem méně náchylná k vložení peptidu. Selektivita je závislá na koncentraci – při velmi vysokých lokálních koncentracích může být LL-37 cytotoxický i pro savčí buňky.

Co je “model meče a štítu” funkce LL-37?

Model popisuje koncentračně závislé funkční přepínání LL-37: při nízkých koncentracích (20 µg/ml) dominuje přímá membránově disruptivní antimikrobiální aktivita. Tato dvojí povaha je základem rozmanitých rolí LL-37 v obraně hostitele a je jedním z důvodů, proč je pečlivé charakterizování dávkové odpovědi nezbytné v jakémkoli in-vitro nebo in-vivo výzkumném kontextu.

Jaká je souvislost mezi LL-37 a psoriázou?

LL-37 je výrazně nadměrně exprimován v psoriatických kožních lézích a silně váže vlastní DNA a RNA uvolněnou z poškozených keratinocytů. Tyto komplexy LL-37/vlastní nukleové kyseliny aktivují plazmacytoidní dendritické buňky přes TLR9 (DNA) a TLR7 (RNA), což vede k IFN-α bohatému autoimunitnímu zánětu charakteristickému pro psoriázu. Cílení na osu LL-37/pDC/TLR je aktivní oblastí farmakologického výzkumu psoriázy.

Proč některé studie nádorů ukazují protinádorový účinek a jiné naopak podporují nádor?

LL-37 má zdokumentované kontextově závislé účinky na nádory. U některých typů nádorů (ovariální, prsní, plicní, kolorektální) zvýšená exprese LL-37 koreluje s horším výsledkem – pravděpodobně prostřednictvím FPRL1-zprostředkovaného proproliferačního a proangiogenního signalizace. U jiných (žaludeční, melanom v některých modelech) má LL-37 přímý membránově disruptivní cytotoxický účinek na nádorové buňky s menší protinádorovou aktivitou. Čistý efekt závisí na typu nádoru, lokální koncentraci, expresi FPRL1 a složení nádorového mikroprostředí.

Další možnosti v Peptidech

Řazeno podle nedávného objemu objednávek na MedsBase — co si ostatní zákazníci v této kategorii vybírají.

BPC-157

US$115.00 – US$705.00Cenové rozpětí: US$115.00 až US$705.00

Retatrutide

US$310.00 – US$6,515.00Cenové rozpětí: US$310.00 až US$6,515.00

BAC Water (Bakteriostatická voda)

US$50.00 – US$150.00Cenové rozpětí: US$50.00 až US$150.00

NAD⁺

US$210.00 – US$1,975.00Cenové rozpětí: US$210.00 až US$1,975.00