Pikavastaus — Mikä on tutkimuskäyttöön tarkoitettu HMG?
HMG (Human Menopausal Gonadotropin, joka tunnetaan myös nimellä menotropin; CAS 61489-71-2) on virtsasta eristetty glykoproteiinihormonivalmiste, joka sisältää yhtä suuren LH- ja FSH-aktiivisuuden (75 IU LH + 75 IU FSH per pullo, vakio 1:1-suhde). Puhdistettu postmenopausaalisilta naisilta — joiden hypofyysin gonadotropiinituotanto on luonnollisesti kohonnut negatiivisen takaisinkytkennän puuttumisen vuoksi — hMG on klassinen kaksois-LHCGR + FSHR-agonisti endokrinologisessa farmakologiassa ja vertailukäyttöinen tutkimusväline protokollissa, jotka vaativat samanaikaista Leydig-solujen / theca-solujen steroidogeneesiä (LH-puoli) ja Sertoli-solujen / granuloosasolujen toimintaa (FSH-puoli). Toimitettu tutkimuskäyttöön tarkoitettu materiaali on virtsasta eristetty glykormi, jonka HPLC-puhtaus on ≥99%. Vain laboratoriotutkimuskäyttöön. Eroaa kliinisistä menotropiinivalmisteista (Menopur, Menogon, Repronex).
📦 Jokainen tilaus on katettuna meidän Reshipment Assurance Policy -politiikkamme piiriin — jos lähetyksesi ei saavu 20 arkipäivässä, lähetämme uuden.
| Tekniset tiedot | Yksityiskohta |
|---|---|
| Yhdisterakenne | Glykoproteiinihormonivalmiste — kiinteä 1:1-seos LH- ja FSH-aktiivisuudesta; kaksois-LH/CG-reseptori (LHCGR) + FSH-reseptori (FSHR) -agonisti; peptidihormonivalmiste |
| Kemiallinen nimi | Human Menopausal Gonadotropin (Menotropin; virtsasta eristetty valmiste; synonyymit: hMG, urofollitropiini-LH:n kanssa, menopausaalinen gonadotropiini) |
| CAS-numero | 61489-71-2 (menotropin / hMG-seosvalmiste) |
| Aktiiviset komponentit | LH (luteinisoiva hormoni, ~30 kDa heterodimeeri; α 92 aa + β 121 aa, glykosyloitu) — 75 IU pullossa; FSH (follikkelia stimuloiva hormoni, ~30 kDa heterodimeeri; α 92 aa + β 111 aa, glykosyloitu) — 75 IU pullossa. α-alayksikkö on yhteinen LH:lle, FSH:lle, HCG:lle ja TSH:lle; β-alayksiköt määräävät reseptorispesifisyyden. Molemmat gonadotropiinit ovat laajalti N- ja O-glykosyloituja. |
| Bioaktiivisuussuhde | LH:FSH aktiivisuus = 1:1 (standardi hMG-suhde 1990-luvun lopun tehojen standardisoinnin jälkeen; molemmat aktiivisuudet mitattu WHO:n bioassaylla kansainvälisten vertailustandardien mukaan) |
| HCG-yhdessäpuhdistus (tutkimukseen liittyvä) | Virtsasta eristettyjen hMG-valmisteiden ominaisuus: julkaistujen koostumusanalyysien mukaan noin 95 % in-vivo LH-reseptorin välittämästä bioaktiivisuudesta johtuu jälkikuukautisesta virtsasta yhdessä puhdistetusta HCG-jäämästä (Wolfenson et al. 2005 ja muut). HCG ja LH sitoutuvat samaan LHCGR:ään samankaltaisella affiniteetilla, mutta HCG:n puoliintumisaika on 33–37 tuntia verrattuna LH:n ~20 minuuttiin — joten pienetkin HCG-määrät hallitsevat in-vivo LH-vastaista signaalia. Tutkijoiden tulisi olla tietoisia tästä verrattaessa hMG:ta puhtaisiin rekombinantti-LH (Luveris) -valmisteisiin. |
| Toimintamekanismi | Kaksois-GPCR-agonisti. LHCGR (Gs-kytketty, Leydig-/theca-/granulosa-/keltarauhasolut) → cAMP-PKA-StAR-CYP17A1-kaskadi → androgenien biosynteesi. FSHR (Gs-kytkentäinen, Sertolin solut miehillä / granulosasolut naisilla) → cAMP-PKA-CYP19A1/aromatasa-kaskadi → spermatogeneesin tuki (mies) tai androgenien muuntuminen estrogeeneiksi + follikulaarinen kypsyminen (nainen). Tämä kaksoisaktivaatio erottaa hMG:n puhtaasta-LH:stä (Luveris / rLH) tai puhtaasta-FSH:stä (Gonal-F / Puregon / rFSH). |
| Sekvenssi | Sekoitettu valmiste – sekä LH että FSH ovat heterodimeerisiä glykoproteiineja. α-alayksikkö (yhteinen) ~92 aa, identtinen LH/FSH/HCG/TSH:n välillä. LH β-alayksikkö ~121 aa, FSH β-alayksikkö ~111 aa. Täydelliset sekvenssit saatavilla UniProtista: LHβ (P01229), FSHβ (P01225), GPHα (P01215). |
| Molekyylikaava | Sekoitettu virtsasta eristetty glykoproteiinivalmiste – FSH (α 92aa + β 111aa) + LH (α 92aa + β 121aa) heterodimeerit suunnilleen 1:1 bioaktiivisuussuhteessa. Yksittäistä molekyylikaavaa ei ole heterogeenisen glykosylaatiokuvion vuoksi. |
| Plasman puoliintumisaika | FSH-aktiivisuus: lopullinen puoliintumisaika ~30–40 h (sialylaatiovetoinen, samankaltainen kuin muilla glykoproteiinihormoneilla). LH-aktiivisuus hMG:ssä: nimellisesti ~10–20 h (mutan käytännössä HCG-fraktion 33–37 h puoliintumisajan ohjaama – katso HCG-kopuhdistus huomio yllä). |
| Muoto | Liofilisoitu valkoisesta kellertävään amorfiseen jauheeseen mannitoli- tai laktoosistabilointimatriisilla; kertakäyttöiset tutkimuspullot |
| Puhdaus | ≥99 % (HPLC-vahvistettu); WHO:n bioanalyysi vahvistaa LH- ja FSH-aktiivisuuden merkityn 75 IU kummankin osalta. COA saatavilla pyynnöstä. |
| Liukoisuus | Uudelleenliuota bakteerisidovassa vedessä 1,0 ml per pullo → 75 IU LH + 75 IU FSH per ml työliuos; muut laimennukset protokollan mukaan. Kakkua liukenee nopeasti kevyellä pyörittelyllä. Älä ravistele; älä vortexaa — korkean leikkausjännityksen sekoitus hajottaa sekä LH:n että FSH:n α/β-heterodimeerit. |
| Säilytys | Liofilisoitu: 2–8 °C avaamattomana lyhytaikaiseen käyttöön; −20 °C pitkäaikaissäilytykseen (vakaa ≥36 kk −20 °C:ssa; ≥18 kk 2–8 °C:ssa). Uudelleenliuotettu: 2–8 °C, käytä ~30 päivän kuluessa. Suojaa valolta. Älä jäädytä uudelleenliuotettua ainetta — jäätymis-sulatusjaksot hajottavat LH:n ja FSH:n α/β-heterodimeerit ja tuhoavat bioaktiivisuuden. |
| Tutkimuskäyttö | Vain laboratoriotutkimuskäyttöön. Ei tarkoitettu ihmisille tai eläimille diagnostiseen tai terapeuttiseen käyttöön. hMG / menotropiini on Maailman antidopingjärjestön (WADA) kiellettyjen aineiden listalla (luokka S2, Peptidihormonit, kasvutekijät ja niihin liittyvät aineet) ja se on kielletty kaikilta urheilijoilta koko ajan. Ihmiskokeisiin osallistuvien tutkijoiden tulisi olla tietoisia tästä sääntelystatuksesta. |
Mikä on HMG (Menotropiini)?
HMG — Ihmisen menopausaalinen gonadotropiini, tunnetaan myös nimellä menotropin (CAS 61489-71-2) — on virtsasta eristetty glykoproteiini-hormonivalmiste, joka sisältää yhtä suuret määrät LH:n (luteinisoiva hormoni) ja FSH:n (follikkelia stimuloiva hormoni) bioaktiivisuutta, standardoitu 75 IU kumpaakin per pullo. Se puhdistetaan ioninvaihto- ja gel-suodatuskromatografialla menopaussin läpikäyneiden naisten kerätyistä virtsanäytteistä, joilla on luontaisesti kohonnut aivolisäkkeen gonadotropiinin eritys (LH ja FSH tyypillisesti 50–100+ mIU/ml kumpaakin) koska munasarjojen negatiivinen takaisinkytkentä häviää menopaussin myötä.
Nimen “menopausaalinen” viittaa tähän lähteeseen: menopaussin läpikäyneiden naisten virtsa on tiheimmin esiintyvä luonnollinen LH:n ja FSH:n lähde teolliseen mittakaavaan tarkoitettuun puhdistukseen, ja hMG:ta on valmistettu tästä lähteestä 1960-luvun alusta lähtien (alkuperäinen Cesare Seronon kehittämä Pergonal-valmiste). hMG:n koostumuksen kehitys on edennyt merkittävästi vuosikymmenten aikana — aikaisemmat valmisteet sisälsivät erittäin vaihtelevia LH:FSH-suhteita ja merkittäviä proteiiniseposteita; nykyaikaiset valmisteet (jotka ovat tutkimusmateriaalimme perusta) on standardoitu 75:75 IU bioaktiivisuuteen per pullo ja ≥99% HPLC-puhtaudella.
hMG on kanoninen kaksinkertainen gonadotropiini farmakologinen työkalu. Kun HCG aktivoi selektiivisesti LHCGR:n, kun puhdas-LH (rekombinantti Luveris) aktivoi selektiivisesti LHCGR:n fysiologisella puoliintumisajalla, kun puhdas-FSH (rekombinantti Gonal-F / Puregon) aktivoi selektiivisesti FSHR:n, hMG aktivoi molemmat reseptorit samanaikaisesti kiinteällä 1:1-suhteella. Nämä kaksi reseptoria ilmentyvät eri solupopulaatioissa gonadeissa — LHCGR Leydigin soluissa / theca-soluissa / luteinoituneissa granuloosasoluissa / keltainen ruumis; FSHR Sertolin soluissa / seinämägranuloosassa — joten kaksinkertainen aktivaatio tuottaa täydellisen fysiologisen gonadotropiinistimulin, joka jäljittelee paremmin endogeenistä aivolisäkkeen gonadotropiinin eritystä kuin yksittäisen reseptorin aktivaatio.
Tutkimukseen liittyvä vivahde: HCG:n yhteispuhdistus. Julkaistut koostumusanalyysit virtsasta eristetyistä hMG-valmisteista raportoivat, että suurin osa in-vivo LH-reseptorin bioaktiivisuudesta johtuu itse asiassa jälkimenopausaalisen virtsan mukana puhdistuneista HCG-jäämistä — noin 95 % LH-reseptorin välittämästä bioaktiivisuudesta joissain analyyseissä (Wolfenson et al., 2005). Tämä johtuu siitä, että HCG ja LH sitoutuvat samaan LHCGR:ään samankaltaisella affiniteetilla, mutta HCG:n plasmassa puoliintumisaika on 33–37 tuntia verrattuna LH:n noin 20 minuuttiin, joten pienetkin HCG-määrät dominoivat kumulatiivista LH-ekvivalenttia signaalia. Tämä on osasyy siihen, miksi hMG tuottaa jatkuvaa Leydig-solujen stimulaatiota huolimatta siitä, että LH:n nimellinen “LH-aktiivisuus” on lyhytkestoinen. Tutkimusprotokollissa, joissa tämä ero on merkityksellinen (puhdas-LH farmakologia vs. HCG:lla kontaminoitunut sekoitettu-LH-signaali), rekombinantti LH (Luveris) on puhtaampi työkalu; protokollissa, jossa tavoitteena on kaksinkertainen LHCGR + FSHR-aktivaatio fysiologisella 1:1-suhteella, hMG on kanoninen viite.
Toimintamekanismi — Kaksinkertainen LHCGR + FSHR-aktivaatio
hMG:n mekanismi on sen kahden komponenttitoiminnan summa, jotka molemmat ovat hyvin tunnettuja endokrinologisessa farmakologiassa:
- LH (ja yhteispuhdistunut HCG) → LHCGR-aktivaatio — LH-komponentti (ja jälkimenopausaalisen virtsan mukana puhdistuneet HCG-jäämät) sitoutuu LH/CG-reseptoriin Leydigin soluissa (kivekset) ja theca / granuloosa / luteaalisoluissa (munasarjat). Gs-kytkentä nostaa cAMP:ta, aktivoi PKA:ta, tehostaa StAR-välitteistä mitokondrion kolesterolitransporttia ja indusoi CYP11A1 / CYP17A1 / 3β-HSD / 17β-HSD steroidogeneettisiä entsyymejä — johtaen de-novo-testosteronin biosynteesiin (mies) tai androstenedionin biosynteesiin (nainen).
- FSH → FSHR-aktivaatio — FSH-komponentti sitoutuu FSH-reseptoriin Sertolin soluissa (kivekset) ja seinämäisissä granuloosasoluissa (munasarja). FSHR on myös Gs-kytketty, mutta sen alajaksoinen ohjelma on erilainen: Sertolin soluissa FSHR-aktivaatio ajaa androgenejä sitovaa proteiinia (ABP), inhibiini B:tä ja rakennetukea, joka ylläpitää spermatogeneesia; granuloosasoluissa FSHR-aktivaatio ajaa CYP19A1:stä (aromaasi), joka muuntaa thecasolujen tuottamat androgenit estrogeeneiksi, ja edistää follikulaarista kypsymistä antraalisen ja ennen ovulaation vaiheiden läpi.
- Yhdistetty kaksisolu-kaksigonadotropiini malli — Klassinen endokriininen viitekehys. Mieskiveksissä LH-stimuloimat Leydigin solut tuottavat testosteronia, joka diffundoituu viereisiin Sertolin soluihin, joissa FSH-indusoima androgenejä sitova proteiini ja Sertolin solun metabolinen koneisto muuntavat sen korkean intratestikulaarisen testosteronin mikroympäristöksi, jonka spermatogeneesi vaatii. Naisten munasarjoissa LH-stimuloimat thecasolut tuottavat androgeeneja, jotka diffundoituvat viereisiin granuloosasoluihin, joissa FSH-indusoitu aromaasi muuntaa ne estrogeeneiksi. Kaksisolu-kaksigonadotropiini malli on kanoninen viitekehys, ja hMG on kanoninen farmakologinen työkalu molempien puolien samanaikaiseen käyttöön.
- Reseptorin desensitisoituminen ja takyfylaksia — Sekä LHCGR että FSHR käyvät läpi arrestiinin välittämän desensitisoitumisen jatkuvan agonistin altistuksen jälkeen. Toistuvat korkean annoksen hMG-annokset voivat aiheuttaa reseptorien alaspäin säätelyn — hyvin dokumentoitu ilmiö julkaistussa gonadotropiini-farmakologian tutkimuksessa, joka liittyy kroonisiin annostelumenetelmiin.
- Hypotalamus-aivolisäkkeen takaisinkytkentä — Kuten HCG:ssä, hMG:n aiheuttama sukupuolihormonien tuotanto vaikuttaa takaisinkytkentänä hypotalamukseen ja aivolisäkkeeseen tukahduttaen endogeenisen GnRH:n ja LH/FSH:n eritystä. HPG-tukahdutustutkimuksessa (testosteronikorvaus, AAS-altistus, farmakologinen GnRH-antagonismi) hMG ohittaa hypotalamus-aivilisäkkeen eston vaikuttamalla suoraan sukupuolirauhasten reseptoreihin — säilyttäen sekä Leydigin solujen toiminnan (LH-puoli) että Sertolin solujen / spermatogeneesin tukitoiminnan (FSH-puoli) samanaikaisesti, mikä erottaa hMG:n puhtaista HCG-protokollista tässä tutkimuskontekstissa.
hMG:n farmakokinetiikka heijastaa laajalti sen komponenttien farmakokinetiikkaa: FSH-aktiviisuus säilyy 30–40 tunnin lopullisella puoliintumisajalla, LH-vastaava aktiivisuus hallitsee pitkäikäisen yhdessä puhdistetun HCG:n (33–37 h), ja yhdistetty valmiste tuottaa jatkuvan 24–72 tunnin kaksinkertaisen gonadotropiinistimulaation annosta kohden. Tyypillinen tutkimusprotokollan annostelu on 75–225 IU SC päivittäin jyrsijä- tai ihmiskoetutkimuksissa — vastaa 1–3 pulloa 75 IU vahvuudesta.
Julkaistut tutkimussovellukset
hMG:ää käytetään laboratoriotutkimuksissa, joissa tutkitaan:
- Gonadotropiinifarmakologia — kanoninen kaksinkertainen reseptoriviite — useimmin viitattu kaksois-LHCGR + FSHR-agonisti julkaistussa gonadotropiinitutkimuksessa; standardiviiteyhdiste LH-vain, FSH-vain ja yhdistetyn gonadotropiinisignaalin erittelemiseen
- Spermatogeneesin induktiotutkimus — hypogonadotrooppisessa hypogonadismissa olevissa jyrsijämalleissa hMG (HCG-täydennyksellä tai ilman) on kanoninen työkalu spermatogeneesin indusoimiseksi palauttamalla sekä Leydigin solujen testosteronin tuotanto että Sertolin solujen FSH-tuki; standarditutkimusprotokollan sykli on 75–150 IU SC kolme kertaa viikossa 6–24 kuukauden ajan kliinisessä translatiotutkimuksessa
- Naisten munasarjojen stimulaatiotutkimus — historiallinen perustyökalu in-vitro -hedelmöitystutkimuksessa; hMG edistää follikkelien kehitystä antraalivaiheesta esiovulaatiovaiheeseen julkaistuissa ovulaationinduktio-protokollissa, yleensä yhdistettynä HCG:hen ovulaation laukaisijana; laajasti käytetty tutkimuksessa polykystisestä omaariesiöstä (PCOS), selittämättömästä hedelmättömyydestä ja avustetuista lisääntymistekniikoista
- Kaksisolujen kahden gonadotropiinin mallitutkimus — kanoninen viitekehäs gonadaalisten steroidien synteesin farmakologiassa; hMG on standardityökalu molempien mallin puolten samanaikaiseen aktivoimiseen; julkaistu Sertoli-Leydig -yhteiskasvatus- ja theca-granulosa -yhteiskasvatus-tutkimus käyttää hMG:ta fysiologisen kaksoisreseptoristimulan toistamiseksi
- HPG-akselin tukahdutus-palautumistutkimus — julkaistuissa tutkimusmalleissa, joissa endogeeninen LH/FSH on tukahdutettu (eksogeenisen testosteronin, AAS-altistuksen tai GnRH-antagonismin avulla), hMG säilyttää sekä Leydig-solujen että Sertoli-solujen toiminnan suoralla gonadaalisten reseptoreiden aktivoinnilla — eroten näin pelkästään HCG:hen perustuvista protokollista, jotka säilyttävät vain LH-puolen toiminnan ja riskeeraavat Sertoli-solujen atrofian
- Vertailu farmakologia vs puhdas-LH / puhdas-FSH / HCG — julkaistut suorat vertailut hMG:sta ja rekombinantin LH:n (Luveris), rekombinantin FSH:n (Gonal-F / Puregon), rekombinantin HCG:n (Ovidrel) sekä eri yhdistelmien välillä ovat laajoja; hMG on virtsasta eristetty 1:1-seosviite, johon kaikki nämä vertaillaan
- Follikkelien kehitys ja granulosasolubioloogia — julkaistu ex-vivo -follikkelikulttuuri- ja primaaristen granulosasolujen tutkimus käyttää hMG:ta samanaikaisen theca-solujen androgenituotannon ja granulosasolujen aromataasin induktion aikaansaamiseksi — fysiologisesti merkityksellisin in-vitro -stimulus saatavilla
- Keltarauhasen biologia — jatkuva LHCGR-aktivaatio LH-komponentin (ja yhdessä puhdistetun HCG:n) avulla ylläpitää keltarauhasen toimintaa ja progesteronin tuotantoa; käytetään tutkimuksissa keltaisvaiheesta ja luteo-plasentaalisesta siirtymästä
Laajemman kontekstin saamiseksi HPG-akselin ja lisääntymisjärjestelmän tutkimuspeptideistä tässä luettelossa, katso HCG (Ihmisen korialgonadotropiini) (puhdas LHCGR-agonisti — suora vertailu; vain LH-puolen aktiivisuus), Kisspeptiini-10 (yläjuoksun hypotalamuksen Kiss1R-agonisti — aiheuttaa endogeenisen GnRH-pulsaatio), PT-141 (Bremelanotiidi) (melanokortiinireseptorifarmakologia — seksuaalitoiminnan tutkimus), ja Oksitosiini-asetaatti (takaraivolisäkkeen peptidihormoni). Selaa koko tutkimuspeptidien ja yhdisteiden luettelo.
Saatavat vahvuudet ja pitoisuudet
MedsBase varastoi HMG:n (virtsasta eristetty menotropiini) yhdessä liofilisoidussa pullossa, jonka vahvuus on kalibroitu standardiin 1:1 LH:FSH bioaktiivisuusyksikköön. Pullo on saatavilla 10-pulloisessa tai 20-pulloisessa pakkauksessa:
| Pullon vahvuus | Tyypillinen tutkimuskäyttötapaus | Pakkauskoot |
|---|---|---|
| 75 IU LH + 75 IU FSH | Standardi tutkimusvahvuus (kansainvälinen viiteyksikköannos) — yksittäinen annos kaksoisgonadotropiinistimulaatiota, spermatogeneesi-induktio protokollat (75–225 IU SC kolme kertaa viikossa), munasarjojen stimulaatiotutkimus, kaksisoluiset kaksigonadotropiini ko-kulttuuri stimulaatio, vertaileva farmakologia vs rekombinantti puhdas-LH ja puhdas-FSH valmisteet | 10 tai 20 pulloa |
75:75 IU pullo on kansainvälinen viiteyksikköannos ja muoto, jota käytetään lähes kaikissa julkaistuissa gonadotropiinitutkimuksissa ja kliinisessä käytännössä. Usean pullon annostelu (150 IU, 225 IU per annos) on standardi korkeamman annoksen protokollissa. 20-pullon pakkaus on taloudellisempi osto per-IU pitkitetyille jaksoille tai useille kohorteille.
Vertailu — HMG vs HCG
HCG ja hMG ovat kaksi virtsasta peräisin olevaa gonadotropiinivalmistetta tässä luettelossa, ja ne kohdistuvat gonadotropiinireseptorijärjestelmään mekanistisesti eri tavoin. HCG on puhdas LH/CG-reseptoriagonisti — vain Leydig-solujen / theca-solujen aktivaatio. hMG on duaali LH + FSH -valmiste – aktivoi molemmat puolet kahden solun kahden gonadotropiinin mallia samanaikaisesti. Valinta niiden välillä tutkimuksessa riippuu siitä, tarvitseeko protokolla vain LH-puolen aktivoinnin vai yhdistetyn LH-puolen + FSH-puolen aktivoinnin.
| Kriteeri | HMG (Menotropiini) | HCG |
|---|---|---|
| Koostumus | Kiinteä 1:1-seos: LH 75 IU + FSH 75 IU per pullo (+ jälki-HCG, joka dominoi LH-vastaavaa in-vivo-signaalia) | Puhdas HCG (virtsasta eristetty) – yksittäinen glykoproteiini |
| Reseptorit aktivoituvat | LHCGR ja FSHR – duaali gonadotropiini-reseptorin aktivaatio | Vain LHCGR – yksittäinen reseptori |
| Lähde | Vaihdevuosien jälkeinen virtsa | Raskaana olevien naisten virtsa (uHCG) tai rekombinantit CHO-solut (rHCG) |
| Parhaat tutkimussovellukset | Spermatogeneesin induktio (säilyttää Sertoli-solujen toiminnan), munasarjafollikkelien stimulaatio, kahden solun kahden gonadotropiinin mallin tutkimus, duaalireseptorifarmakologia | Vain Leydig-solujen stimulaatio, ovulaation laukaisu (LH-piikin jäljittely), Leydig-soluihin kohdistuva HPG-tukahdutuksen palautumistutkimus, LHCGR-farmakologia |
| Plasman puoliintumisaika | FSH ~30–40 h; LH-vastaava aktiivisuus hallitsee yhdessä puhdistettu HCG (33–37 h) | 33–37 h (terminaalivaihe) |
| Tyypillinen tutkimusannos | 75–225 IU SC (1–3 pulloa) per annos; 3×/viikko kroonisissa protokollissa | 500–5 000 IU SC/IM (yksi bolus); 250–500 IU/päivä kroonisissa protokollissa |
| Vial-annostusyksikkö | 75 IU bioaktiivisuus (kansainvälinen vertailuyksikköannos) | 5 000 tai 10 000 IU bioaktiivisuus |
| WADA-status | Kielletty kaikissa tilanteissa miesurheilijoille (S2 — peptidihormonit) | Kielletty kaikissa tilanteissa miesurheilijoille (S2 — peptidihormonit); naisurheilijoille poikkeus |
Tutkimuksessa, joka keskittyy kaksois-LHCGR + FSHR-aktivaatioon, spermatogeneesin induktioon tai kanoniseen kahden solun kahden gonadotropiinin malliin, hMG on standardivertailuaine. Tutkimuksessa, joka keskittyy Leydig-solun stimulaatioon, ovulaation laukaisemiseen tai HCG-spesifiseen LHCGR-farmakologiaan, HCG on kohdennetumpi työkalu. Katso myös Kisspeptiini-10 hypotalamuksen Kiss1R/GnRH-pulsatiivisuuden tutkimuksessa.
Säilytys ja liuotus
Ennen liuotusta: Säilytä liofilisoidut vialit jääkaapissa 2–8 °C:ssa alkuperäisessä pakkauksessa lyhytaikaista käyttövarastoa varten. Pitkäaikaissäilytykseen pakasta avaamattomat vialit −20 °C:ssa (vakaa ≥36 kuukautta −20 °C:ssa; ≥18 kuukautta 2–8 °C:ssa). Liofilisoitu kakkue on mannitoli- tai laktoosistabiloitu ja sietää kohtuullisesti lyhytaikaista huoneenlämpötilassa oleskelua käsittelyn aikana, mutta se tulee palauttaa viileään säilytykseen välittömästi. Suojaa valolta.
Uudelleenliuotusmenettely: Jokaista 75 IU:n pulloa kohden ruiskuta 1,0 ml bakteerista vettä pullon sivuseinämää pitkin (ei suoraan liofilisoituun kakkualustaan) — tämä tuottaa 75 IU LH + 75 IU FSH/ml työliuoksen. Tutkimusprotokollissa, joka vaatii korkeampia pitoisuuksia (usean pullon yhdistäminen korkeampaan yksittäisannokseen), rekonstituoi 2–3 pulloa samalla yhteensä 1,0 ml liuottimella saadaksesi 150–225 IU/ml. Kierrä varovasti liuottaaksesi — älä ravista, älä käytä vortexia. Korkean leikkausjännityksen sekoitus irrottaa sekä LH:n että FSH:n α/β-heterodimeerit ja tuhoaa gonadotropiinireseptorin bioaktiivisuuden. Mannitoliin perustuva liofilisaatiokakku liukenee yleensä 30–60 sekunnissa varovaisella kiertämisellä.
Kriittiset säilytyssäännöt rekonstituoidulle aineelle: Rekonstituoinnin jälkeen säilytä 2–8 °C:ssa ja käytä 30 päivän kuluessa. Älä jäädytä rekonstituoitua hMG:ta — jäätymis-lämmityssyklit irrottavat LH:n ja FSH:n α/β-heterodimeerit (sama fysikaalis-kemiallinen rajoite kuin HCG:ssa) ja tuhoavat bioaktiivisuuden peruuttamattomasti. Suojaa valolta. Hävitä, jos liuos on samea, siinä on partikkeleita tai värissä on huomattava muutos. Tutkimusprotokollissa, joka vaatii useita alikappaleita, valmista alikappaleet rekonstituoinnin yhteydessä ja säilytä ne erikseen 2–8 °C:ssa jäädyttämisen sijaan.
Usein Kysytyt Kysymykset
Mikä ero on HMG:lla ja HCG:lla?
HCG on puhdas LH/CG-reseptoriagonisti — yksi glykoproteiinihormoni (CAS 9002-61-3), joka sitoutuu ja aktivoi vain LHCGR-reseptorin Leydig-/theca-/granulosa-/luteaalisoluissa. hMG on 1:1-seos LH:n ja FSH:n bioaktiivisuudesta — erilliset glykoproteiinihormonit (yhdistetty CAS 61489-71-2), jotka sitoutuvat sekä LHCGR- (LH-puoli) että FSHR-reseptoreihin (FSH-puoli). Kliininen ja tutkimuksellinen seuraus on, että hMG tuottaa kaksinkertaista reseptoristimulaatiota, joka aktivoi molemmat puolet kahden solun kahden gonadotropiinin mallista (Leydig + Sertoli miehillä; theca + granulosa naisilla), kun taas HCG tuottaa vain LHCGR-puolen yksittäisen reseptoristimulaation.
Mikä on HCG:n yhteispuhdistus hMG:ssa ja miksi sillä on merkitystä tutkimuksessa?
Julkaistut virtsasta peräisin olevien hMG-valmisteiden koostumusanalyysit raportoivat, että noin 95 % in vivo LH-reseptorivälitteisestä bioaktiivisuudesta johtuu itse asiassa jälkeisessä vaiheessa virtsasta puhdistetusta HCG-jäämästä, ei LH:sta itsestään (Wolfenson et al., 2005). Tämä johtuu siitä, että HCG ja LH sitoutuvat samaan LHCGR-reseptoriin samankaltaisella affiniteetilla, mutta HCG:n plasmahäviöaika on 33–37 tuntia verrattuna LH:n noin 20 minuuttiin — joten jopa pienet määrät yhteispuhdistettua HCG:ta hallitsevat kumulatiivista in vivo LH-ekvivalenttia signaalia. Tutkimusprotokollissa, joissa tämä ero on merkittävä (esim. puhtaan LH:n farmakologian vertaaminen HCG:lla kontaminoituun sekoitettuun LH-signaaliin), rekombinantti LH (Luveris) on puhtaampi työkalu. Protokollissa, jossa tavoitteena on kaksinkertainen LHCGR + FSHR-aktivaatio kiinteällä 1:1-suhteella, hMG on kanoninen viite.
Miksi hMG:ää eristetään vaihdevuosien naisten virtsasta?
Vaihdevuosien naisilla munasarjojen negatiivinen takaisinkytkentä hypotalamus-aivolisäkkeakselille heikkenee, mikä lisää aivolisäkkeen LH- ja FSH-eritystä merkittävästi – vaihdevuosien naisten tyypillinen seerumin LH- ja FSH-pitoisuus on 50–100+ mIU/ml kummallekin, mikä on kertaluokkaa korkeampi kuin ennen vaihdevuosia. Molemmat hormonit erittyvät sitten virtsaan suurennettuna pitoisuutena. Kerätyistä vaihdevuosien naisten virtsanäytteistä saadaan siten tiheimmin LH:ta ja FSH:ta teolliseen mittakaavaan soveltuvaan eristämiseen. hMG-teollisuus perustui tähän oivallukseen 1960-luvun alussa (Pergonal oli Seronon alkuperäinen valmiste) ja toiminta jatkuu edelleen, vaikka suuri osa kliinisestä markkinoista on siirtynyt rekombinanttien puhdas-LH- ja puhdas-FSH-valmisteiden käyttöön.
Mitä julkaistuja annosvälejä on käytetty tutkimuksessa?
Yksittäisannostutkimuksissa käytetään tyypillisesti 75–225 IU:n alihihna-annoksia (1–3 pulloa 75 IU:n vahvuista) 3 kertaa viikossa tai päivittäin pitkäaikaisissa tutkimusprotokollissa. Spermatogeneesin käynnistämiseen hypogonadotrooppisessa hypogonadismitutkimuksessa käytetään yleisesti 75–150 IU 3 kertaa viikossa 6–24 kuukauden ajan yhdistettynä HCG:hen (HCG tarjoaa lisästimulaatiota Leydigin soluille). In-vitro Sertolin solujen tai granuloosasolujen viljelyssä käytetään tyypillisesti 1–10 IU/ml kasvualustassa. Tutkijoiden tulisi tutustua lajiin, malliin ja lopputulokseen sopivaan ensisijaiseen kirjallisuuteen.
Mikä ero on hMG:llä ja puhtaalla rekombinantti FSH:lla (Gonal-F / Puregon)?
Puhdas rekombinantti FSH (follitropiini alfa / Gonal-F; follitropiini beeta / Puregon; valmistettu CHO-soluissa kloonatusta FSH α- ja β-cDNA:sta) sisältää vain vain FSH-bioaktiivisuutta – ei LH:ta eikä HCG:ta. hMG sisältää molempien LH:n ja FSH:n bioaktiivisuuden suhteessa 1:1 (sekä jälkiä HCG:sta). Tutkimusprotokollissa, joka vaatii puhtaan FSHR-aktivoinnin erillään LHCGR-signaloinnista, rekombinantti FSH on oikea työkalu. Protokollissa, joka vaatii molempien reseptoreiden aktivoinnin fysiologisessa suhteessa, hMG on oikea valinta. Julkaistuissa vertailevissa kokeissa munasarjastimulaatiotutkimuksissa on havaittu molempien tuottavan suunnilleen samanlaisia follikkelien kehitystuloksia, mutta hieman erilaisia estradiolivasteita (hMG tuottaa yleensä hieman korkeampia keskiarvon estradioli-arvioita LH-komponentin tarjoaman androgeenisen substraatin vuoksi granuloosasolujen aromataasille).
Miksi uudelleenliuotettua hMG:ää ei voi jäädyttää?
Sama syy kuin HCG:lle – sekä LH että FSH ovat kahdesta ei-kovalenttisesti sitoutuneesta alayksiköstä (α + β) koostuvia heterodimeerejä. α/β-vuorovaikutus on stabiili lyofilisaatiokakussa (ei vettä häiritseväksi vuorovaikutusta) ja stabiili jääkaapissa 2–8 °C:ssa (dissosiaation kinetiikka on hidasta matalassa lämpötilassa). Mutta jääkiteiden muodostuminen jäädytyksessä erottaa fyysisesti alayksiköt toisistaan, ja ne eivät liity uudelleen yhteen tehokkaasti sulamisen jälkeen. Tuloksena jäädytetty ja sulatettu hMG säilyttää suuren osan immunoreaktiivisuudestaan mutta menettää suuren osan bioaktiivisuudestaan. Lyofilisoitua hMG:ää voidaan jäädyttää ja se on stabiili −20 °C:ssa; uudelleenliuotettua hMG:ää ei voi jäädyttää.
Mikä on hMG:n WADA-sääntelyasema?
hMG / menotropiini on Maailman antidopingjärjestön (WADA) kiellettyjen aineiden listalla luokassa S2 (Peptidihormonit, kasvutekijät, niihin liittyvät aineet ja mimetiikat). Se on kielletty kaikissa tilanteissa – sekä kilpailu- että kilpailuvapaassa ajassa – miesurheilijoille. hMG:lla ihmisillä tekevien tutkijoiden tulee olla tietoisia tästä sääntelyasemasta. Laboratorioissa tehtäville in-vitro- ja jyrsijöillä tehtäville in-vivo-tutkimuksille WADA-status on vain tiedollinen.
Miten tämä tutkimuskäyttöön tarkoitettu hMG vertautuu kaupallisiin kliinisiin valmisteisiin (Menopur, Menogon, Repronex)?
Kaupalliset kliiniset valmisteet ovat virtsasta eristettyä menotropiinia (Menopur, Menogon, Repronex; historiallinen Pergonal-valmiste on pääosin poistunut käytöstä), joka on pakattu erilaisiin valmistajan tuotekoodeihin avustettuun lisääntymisteknologiaan soveltuvaan kliiniseen käyttöön. Täällä tarjottava tutkimuskäyttöön tarkoitettu hMG on sama virtsasta eristetty valmiste, jonka HPLC-puhtaus on ≥99%, ja sitä toimitetaan ilman kliinistä käyttötarkoitusta varten tarkoitettua etikettiä ja se on tarkoitettu vain laboratoriotutkimukseen. Tutkijoiden, jotka etsivät kliiniseen käyttöön tarkoitettua menotropiinia, tulisi hankkia se kliinisen toimitusketjun kautta; tutkijat, jotka etsivät tutkimuskäyttöön soveltuvaa ainetta in-vitro-reseptorifarmakologiaan, jyrsijöiden in-vivo-työhön tai muihin laboratoriosovelluksiin, voivat käyttää täällä tarjottua ainetta.
Voiko hMG:ää yhdistää HCG:n, Kisspeptiini-10:n tai testosteronin kanssa tutkimusprotokollissa?
Kyllä – nämä yhdisteet kohdistuvat eri osiin HPG-akselia ja niitä yhdistellään yleisesti julkaistuissa tutkimuksissa. Yleisimmin julkaistut yhdistelmät ovat hMG + HCG (standardi kliininen ja tutkimuskäyttöinen protokolla spermatogeneesin käynnistämiseen hypogonadotrooppisessa hypogonadismimallissa – hMG tarjoaa FSH-puolen tuen, lisä-HCG tarjoaa lisä-LH-puolen stimulaation); hMG + Kisspeptiini-10 (ylä- ja alavirran erittely – kisspeptiini stimuloi endogeenistä GnRH:ta kun hMG tarjoaa suoraa sukurauhasen stimulaatiota); hMG + eksogeeninen testosteroni (HPG-supression palautumistutkimukseen, jossa testosteroni alentaa endogeenistä LH/FSH:ta ja hMG ohittaa supression vaikuttamalla suoraan sukurauhasessa). Liuota jokainen erikseen ja noudata kunkin yhdisteen säilytysohjeita – uudelleenliuotettua hMG:ää tai HCG:ta ei saa jäädyttää.
Muut tutkimuspeptidit HPG-akselin ja lisääntymistutkimuksen alueella
- HCG (Ihmisen korialgonadotropiini) — Puhdas LH/CG-reseptoriagonisti — suora vertailu; vain LH-puolen aktiivisuus
- Kisspeptiini-10 — Hypotalamuksen Kiss1R-agonisti — ylävirran HPG-akselin säätelijä, stimuloi GnRH-pulsaatioita
- PT-141 (Bremelanotiidi) — Melanokortiini-4-reseptoriagonisti — seksuaalitoimintatutkimus
- Oksitosiini-asetaatti — Takaraivolisäkkeen nonapeptidi — lisääntymis- ja sosiaalisten sidosten tutkimus
- Tesamorelin — GHRH-analogi — eri endokriiniakseli, yleisesti yhteistutkittu
- BAC Vesi (Bakteriostaattinen vesi) — Vaaditaan minkä tahansa liofilisoidun pullon uudelleenliuottamiseen — steriili, 0,9 % bentsyylialkoholia sisältävä laimennusaine

























Arvostelut
Ei vielä arvosteluja